[發明專利]大興安嶺野生金老梅總三萜提取物的新型制備方法

有效

• 申請號: 201310631038.4
• 申請日: 2013-11-27
• 公開（公告）號: CN103623753A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發明（設計）人: 張亞紅;朱靜娟
• 申請（專利權）人: 大興安嶺嘉迪歐營養原料有限公司
• 主分類號: B01J19/08
• 分類號: B01J19/08;B01D15/00
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• 代理人: 暫無信息

技術領域：

本發明屬于天然有機化學領域，涉及一種從大興安嶺野生植物金老梅里提取總三萜的新方法，特別是涉及一種利用高壓脈沖電場技術提取、聚酰胺柱層析純化、聚酰胺藕聯大孔樹脂二次純化總三萜的新方法。

背景技術：

金老梅，別名金露梅，灌木，高0.5-2m。多分枝，樹皮縱向剝落。小枝紅褐色，幼時被長柔毛?，F狀復葉，小葉2對，稀3小葉；小葉片長圓形、倒卵長圓形或卵狀披針形，長0.7-2cm，寬0.4-1cm，先端急尖或圓鈍；基部楔形，全緣，邊緣平坦，兩面疏被柔毛或絹毛或脫落近無毛?；▋尚裕瑔位ɑ驍刀渖谥?，花梗密被長柔毛或絹毛；花直徑2.2-3cm；花、果期6-9月。

國內一般用有機溶劑提取法提取總三萜，常用甲醇、乙醇做為溶劑。近年來也有采用微波輔助提取、超聲波提取，用大孔樹脂進行純化的報道。傳統方法提取總三萜需要幾小時至十幾小時，操作溫度高且得率低，能耗大。

發明內容：

本發明主要采用高壓脈沖電場技術提取，聚酰胺藕聯大孔樹脂吸附純化，產品不僅得率高，而且純度高。所得總三萜提取物用HPLC進行檢測，含量最高可達96.1％。

優點：大大加快了提取速度，同時極大提高總三萜有效成分含量，克服了常規提取提取物純度低、得率低的缺點。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：

一種利用高壓脈沖電場提取技術、聚酰胺藕聯大孔樹脂吸附純化總三萜的新方法，其步驟如下：

(1)前處理：取新鮮金老梅葉或干燥好的葉子，清洗備用；

(2)高壓脈沖電場提取：以不同濃度乙醇溶液為溶劑，液料比為1：10-15，在一定電場強度、適當脈沖數處理幾分鐘；

(3)精濾處理：采用一定過濾精度的聚四氟乙烯膜，在一定溫度和壓力下精濾處理；

(4)聚酰胺柱層析：

采用一定目數的聚酰胺樹脂裝柱，控制提取液與聚酰胺用量比，室溫下以一定流速吸附飽和；解吸時先用水除雜，再用不同體積比濃度的乙醇溶液解吸，控制流速，收集洗脫液，檢測總三萜含量；

(5)聚酰胺與大孔樹脂樹脂聯用純化：

取處理過的聚酰胺樹脂鋪在不同型號的大孔樹脂柱上，徑高比為1：5-7，過上步所得洗脫液，控制上樣液質量濃度，上樣速率；先用2BV去離子水沖洗樹脂，再用不同體積比濃度的乙醇溶液，以1-3BV/h流速洗脫，收集洗脫液，檢測總三萜含量；

(6)真空冷凍干燥：收集總三萜溶液，在適當溫度、干燥壓力下冷凍干燥；

(7)檢測：采用高效液相色譜法，紫外檢測器在一定波長進行檢測，金老梅總三萜純度為95％以上。

具體實施方式：

實施例1：

一種利用高壓脈沖電場提取技術、聚酰胺藕聯大孔樹脂吸附純化總三萜的新方法，其步驟如下：

(1)前處理：取100g新鮮金老梅葉，清洗備用；

(2)高壓脈沖電場提取：以50％乙醇溶液為溶劑，液料比1：12，電場強度30kV/cm、脈沖數7，處理4分鐘；

(3)精濾處理：采用聚四氟乙烯膜，過濾精度0.2μm，在50℃，0.2MPa壓力下精濾處理；

(4)聚酰胺柱層析：

采用80目的聚酰胺樹脂裝柱，控制提取液與聚酰胺用量比1：6，室溫下以3BV/h流速吸附飽和；解吸時先用水除雜，再用60、65、70％乙醇溶液解吸，控制流速，收集洗脫液；

(5)聚酰胺與大孔樹脂樹脂聯用純化：

取處理過的聚酰胺樹脂鋪在HPD100大孔樹脂上，徑高比為1：6，過上步所得洗脫液，上樣液質量濃度2.0mg/mL，上樣速率1BV/h；先用2BV去離子水沖洗樹脂，再用75％的乙醇溶液，以1BV/h流速洗脫，收集洗脫液，檢測總三萜含量；

(6)真空冷凍干燥：收集總三萜溶液，預凍溫度-30℃，工作壓力20Pa，升華溫度55℃，解析溫度60℃，得粉末1.74g；

(7)檢測：采用高效液相色譜法，紫外檢測器在一定波長進行檢測，金老梅總三萜純度為96.1％。

實施例2：

一種利用高壓脈沖電場提取技術、聚酰胺藕聯大孔樹脂吸附純化總三萜的新方法，其步驟如下：

(1)前處理：取50g新鮮金老梅葉，清洗備用；

(2)高壓脈沖電場提取：以60％乙醇溶液為溶劑，液料比1：15，在電場強20kV/cm度、脈沖數5，處理3分鐘；

(3)精濾處理：采用聚四氟乙烯膜，過濾精度0.3μm，在55℃、0.3MPa壓力下精濾處理；

(4)聚酰胺柱層析：