[發明專利]一種診斷人類脊髓性肌萎縮癥的熒光定量PCR試劑盒

有效

• 申請號: 201310616780.8
• 申請日: 2013-11-27
• 公開（公告）號: CN103614477A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 徐湘民;周萬軍;李亮
• 申請（專利權）人: 南方醫科大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 廣州市天河廬陽專利事務所 44244
• 代理人: 胡濟元

1.一種診斷人類脊髓性肌萎縮癥的熒光定量PCR試劑盒，該試劑盒包括擴增引物和熒光探針，其特征在于，所述的擴增引物為，一對特異性擴增SMN1和SMN2基因的共用引物、一對特異性擴增NAIP基因的引物和一對特異性擴增參比序列的引物；所述的熒光探針為，特異性檢測SMN1基因的熒光探針、特異性檢測SMN2基因的熒光探針、特異性檢測NAIP基因的熒光探針和特異性檢測參比序列的熒光探針；其中，

（1）所述的一對特異性擴增SMN1和SMN2基因的共用引物中，

上游引物序列為：5’-CATCCATATAAAGCTATCTATATATAG-3’（SEQ?NO.1），

下游引物序列為：5’-CTTAATTTAAGGAATGTGAGCACCT-3’（SEQ?NO.2）；

（2）所述的一對特異性擴增NAIP基因的引物中，

上游引物序列為：5’-TTGTGACTTATGAGCCGTACAGC-3’（SEQ?NO.3），

下游引物序列為：5’-AGGCTACAGCAGAAGCACTGAAT-3’（SEQ?NO.4）；

（3）所述的一對特異性擴增參比序列的引物中，

上游引物序列為：5’-GAACACACATGTCAGAAGTCTAAG-3’（SEQ?NO.5），

下游引物序列為：5’-ACCTCCAGTTAGATCTTCACTTCT-3’（SEQ?NO.6）；

（4）所述的特異性檢測SMN1基因的熒光探針為：

5’-TTTGATTTTGTCTGAAACCCTGTAAGG-3’（SEQ?NO.7），該探針的熒光素及其淬滅基團為5’-HEX,3’-BHQ1；

（5）所述的特異性檢測SMN2基因的熒光探針為：

5’-TTTTGATTTTGTCTAAAACCCTGTAAGGA-3’（SEQ?NO.8），該探針的熒光素及其淬滅基團為5’-FAM,3’-BHQ1；

（6）所述的特異性檢測NAIP基因的熒光探針為：

5’-ATGGATACCACAGGAGATGGCG-3’（SEQ?NO.9），該探針的熒光素及其淬滅基團為5’-CY5,3’-BHQ2；

（7）所述的特異性檢測參比序列的熒光探針為：

5’-CAAATGCATCAGATTCCACAAGCT-3’（SEQ?NO.10），該探針的熒光素及其淬滅基團為5’-ROX,3’-BHQ2。

（8）所述的參比序列為acctccagtt?agatcttcac?ttctaaagct?aagtgagacc?tgagacccat?gtagacaccc?aagaagcttg?tggaatctga?tgcatttggc?ttagacttct?gacatgtgtg?ttc（SEQ?NO.14），該序列位于NAIP基因端粒側78kb處的GRCh37/hg19chr5:71107506－71107618區間。

2.根據權利要求1所述的一種診斷人類脊髓性肌萎縮癥的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于，該試劑盒還包括DNA聚合酶、正?；蛐蛯φ誫DNA標本、二氯化鎂和dNTPs。