[發明專利]一種快速鑒定月季對白粉病抗性的方法

無效

• 申請號: 201310615202.2
• 申請日: 2013-11-28
• 公開（公告）號: CN103621332A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發明（設計）人: 邱顯欽;紀程;晏慧君;陳敏;張婷;周寧寧;李淑斌;蹇洪英;王其剛;張顥;唐開學
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院花卉研究所
• 主分類號: A01G7/00
• 分類號: A01G7/00
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司 53100
• 代理人: 徐玲菊

1.一種快速鑒定月季對白粉病抗性的方法，其特征在于經過下列各步驟：

（1）以新鮮、健康、完整的月季嫩葉作為侵染材料，用紙袋將嫩葉套袋隔離兩周；

（2）將新采集的月季白粉病菌孢子放入滅菌蒸餾水中，調配成孢子含量數為1×10⁴~1×10⁵/ml的分生孢子懸浮液；

（3）取步驟（1）的月季嫩葉洗凈并吸干表面水份，在每片嫩葉反面以滴液的方式，接種步驟（2）的分生孢子懸浮液20uL后，置于以滅菌蒸餾水為培養介質的培養皿中，封口后在溫度為20～25℃、光照強度為2000～3000lx、光照時間為15～16h/d的條件下培養48~72h；

（4）將步驟（3）培養后的嫩葉浸泡在三氯乙酸質量含量為0.10~0.15%的乙醇脫色液中，于37℃下恒溫脫色36～48h，期間更換2～3次新的上述乙醇脫色液，直至嫩葉完全透明，再用考馬斯亮藍染色液進行染色6~10min，然后用蒸餾水漂洗，最后滴加甘油∶水=1∶1體積比的溶液進行制片；

（5）將步驟（4）的制片置于光學顯微鏡下，觀察并以病情指數統計嫩葉上的白粉菌感染情況，即得到該月季嫩葉對白粉病的抗性。

2.根據權利要求1所述的快速鑒定月季對白粉病抗性的方法，其特征在于：所述步驟（1）的套袋隔離法，將嫩葉提前兩周用紙袋套袋。

3.根據權利要求1所述的快速鑒定月季對白粉病抗性的方法，其特征在于：所述步驟（4）的考馬斯亮藍染色液是質量濃度為0.10~0.15%的三氯乙酸水溶液∶質量濃度為0.50~0.70%的考馬斯亮藍R-250甲醇溶液的體積比=1∶1。

4.根據權利要求1所述的快速鑒定月季對白粉病抗性的方法，其特征在于：所述步驟（5）的病情指數是：

0級為免疫，即無菌絲、無菌落；

1級為高抗，即菌絲長小于100um，無菌落；

2級為中抗，即菌落直徑小于400um；

3級為中感，即菌落直徑小于800um；

4級為易感，即菌落直徑大于1mm。