[發(fā)明專利]血清中甘油三酯的循環(huán)酶測定方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310601423.4
• 申請日: 2013-11-20
• 公開（公告）號: CN103913581A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李立和;鄭寶永;王彥平;李錚;劉果艷
• 申請（專利權(quán)）人: 天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院
• 主分類號: G01N33/92
• 分類號: G01N33/92;G01N21/31;G01N30/06
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1.一種血清中甘油三酯的循環(huán)酶測定方法，其特征在于循環(huán)酶及底物同在試劑I中，試劑II僅含有脂蛋白脂肪酶有效成分；其測定方法為：血清先與試劑I于37℃溫浴3～5分鐘，血清中游離甘油與試劑I進行循環(huán)反應(yīng)生成醌亞胺，加入試劑II后于37℃溫浴4～7分鐘，甘油三酯水解后產(chǎn)生甘油再經(jīng)循環(huán)反應(yīng)生成醌亞胺；反應(yīng)達到一定時間后，儀器在500～520nm波長處檢測，以試劑I反應(yīng)產(chǎn)生的醌亞胺為空白，由試劑II反應(yīng)產(chǎn)生的醌亞胺計算出甘油三酯的含量，計算公式為：

OD_TG＝OD₂-OD₁×[(SV+R₁V₁)/(SV+R₁V₁+R₂V₂)]

甘油三酯濃度＝F×OD_TG

其中OD_TG是甘油三酯產(chǎn)生的吸光度，OD₁是樣品加入試劑I反應(yīng)后測得的吸光度，OD₂是樣品加入試劑II反應(yīng)后測得的吸光度，SV是血清的體積，R₁V₁是試劑I的體積，R₂V₂是試劑II的體積，F(xiàn)是校正因數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清中甘油三酯的循環(huán)酶測定方法，其特征在于第一步和第二步反應(yīng)均采用循環(huán)酶法測定甘油，生成紅色醌亞胺進行測定。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清中甘油三酯的循環(huán)酶測定方法，其特征在于試劑I每升Tris-HCl緩沖液內(nèi)含Tris100mmol～300mmol、2，4-二氯酚1.0mmol～3.0mmol、MgSO₄9.0mmol～15.0mmol、膽酸鈉3.0mmol～5.0mmol、三磷酸腺苷1.5mmol～2.5mmol、甘油激酶100U～160U、磷酸甘油氧化酶1200U～2000U、過氧化物酶1000U～1400U、4-氨基安替比林1.5mmol～2.5mmol、甘油-3-磷酸脫氫酶1200U～2000U、NADH0.8mmol～1.2mmol、Proclin-300防腐劑100μl～300μl；試劑II每升Tris-HCl緩沖液內(nèi)含Tris100mmol～300mmol、脂蛋白脂肪酶1800U～2100U、Triton?X-1000.08g～0.16g、Proclin-300防腐劑100μl～300μl。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的血清中甘油三酯的循環(huán)酶測定方法，其特征在于試劑I和試劑II中Tris-HCl緩沖液的pH值為7.6±0.2。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的血清中甘油三酯的循環(huán)酶測定方法，其特征在于測定的體積比為：樣品∶試劑I∶試劑II＝3∶300～500∶30～70。