[發明專利]血清中甘油三酯的循環酶測定方法

無效

• 申請號: 201310601423.4
• 申請日: 2013-11-20
• 公開（公告）號: CN103913581A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發明（設計）人: 李立和;鄭寶永;王彥平;李錚;劉果艷
• 申請（專利權）人: 天津市寶坻區人民醫院
• 主分類號: G01N33/92
• 分類號: G01N33/92;G01N21/31;G01N30/06
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• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于一種包含酶的測定方法；或是利用可見光，通過測試反應的結果產生顏色變化來測試材料的方法，特別是涉及一種用生化分析儀檢測血清中甘油三酯的循環酶測定方法。?

背景技術

血清中甘油三脂(TG)的測定方法一般可分為化學法、酶法和色譜法3大類。本發明介紹一種循環酶法測定血清中的甘油三酯，甘油三酯(TG)在脂蛋白脂肪酶(LPL)催化下生成甘油和脂肪酸，甘油和ATP在甘油激酶(GK)催化下生成甘油-3-磷酸(G-3P)，被帶入循環反應中，通過磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化為磷酸二羥丙酮(DHAP)，DHAP被甘油-3磷酸脫氫酶(G-3PDH)又還原為G-3P，同時伴有NADH向NAD⁺的轉化，在反復循環中G-3P和DHAP的量不變，而產物H₂O₂累積的量決定于反應時間和每分鐘循環次數，因此，其靈敏度大大超過一般的酶法分析，檢測產物H₂O₂可偶聯過氧化物酶(POD)，可通過Trinder反應比色測定。?

其理論推導如下：?

測定反應如圖2。?

設SV＝1.5μl，R₁＝200μl，R₂＝50μl，t₁＝3min，t₂＝5min，甘油三酯線性范圍11.00mmol/L，血清中游離甘油病理高值為0.60mmol/L。?

根據公式推導：?

v=V1+KnTG[TG]+KmH2O[H2O]]]>

v=V1+KmTG[TG]]]>

v=V[TG]KmTG+[TG]]]>

已知若TG線性范圍為11.0mmol/L，SV＝1.5μl，R₁＝200μl，R₂＝50μl，t₁＝3min，t₂＝5min。?