[發(fā)明專利]一種降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310601388.6
• 申請日: 2013-11-25
• 公開（公告）號: CN103558400A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發(fā)明（設計）人: 李民友;潘能科;高昂
• 申請（專利權）人: 重慶中元生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/531
• 代理公司: 重慶博凱知識產(chǎn)權代理有限公司 50212
• 代理人: 伍倫辰

1.一種降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒，其特征在于，包括試劑R1和試劑R2兩種組分，所述試劑R1主要由緩沖液1、穩(wěn)定劑1、防腐劑1、EDTA、增凝劑和保護劑1組成；所述試劑R2主要由交聯(lián)PCT抗體的聚苯乙烯膠乳微球、緩沖液2、穩(wěn)定劑2、防腐劑2、保護劑2組成，其中聚苯乙烯膠乳微球與PCT抗體之間以共價交聯(lián)方式連接。

2.根據(jù)權利要求1所述的降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中的緩沖液1選自Hepes緩沖液、Tris-HCl緩沖液、MOPS緩沖液、PBS緩沖液、甘氨酸緩沖液、硼砂緩沖液中的一種或幾種，其pH為7.0～9.0，濃度為25～500mmol/L；

所述試劑R2中的緩沖液2選自PBS緩沖液、硼砂緩沖液、甘氨酸緩沖液、Hepes緩沖液、GOODS緩沖液、MOPS緩沖液中的一種或幾種，其pH為7.0～9.0，濃度為25～500mmol/L。

3.根據(jù)權利要求1所述的降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中的穩(wěn)定劑1選自KCl、NaCl、CaCl中的一種或者幾種，其質(zhì)量濃度為0.5%～10%；

所述試劑R2中的穩(wěn)定劑2采用離子穩(wěn)定劑和懸浮穩(wěn)定劑配合使用；其中離子穩(wěn)定劑為NaCl、KCl、Na₂CO3、Na₂SO4或者K₂SO4，懸浮穩(wěn)定劑為PEG8000、蔗糖、甘油或者葡萄糖。

4.根據(jù)權利要求1所述的降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中的防腐劑1為疊氮鈉、硫柳汞或者ProClin300；

所述試劑R2中的防腐劑2為疊氮鈉、硫柳汞或ProClin300。

5.根據(jù)權利要求1所述的降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中的增凝劑為PEG8000或者葡聚糖。

6.根據(jù)權利要求1所述的降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中的聚苯乙烯乳膠微球的表面官能團為氨基、羧基、酰肼、醛基或環(huán)氧基，聚苯乙烯乳膠微球的的粒徑在100～600nm。

7.根據(jù)權利要求1所述的降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中的PCT抗體為鼠抗人PCT抗體、山羊抗人降鈣素原IgG抗體或兔抗人降鈣素原IgG抗體的一種或者幾種。

8.根據(jù)權利要求1所述的降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中的保護劑1為牛血清白蛋白；所述試劑R2中的保護劑2為牛血清白蛋白。

9.根據(jù)權利要求1所述的降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒，其特征在于，所述EDTA的濃度為10～100mmol/L。

10.根據(jù)權利要求1所述的降鈣素原乳膠增強免疫比濁法檢測試劑盒，其特征在于，采用如下方法制備：

（1）試劑R1的制備：

在緩沖液1中加入穩(wěn)定劑1、增凝劑、防腐劑1、保護劑1和EDTA，攪拌混合均勻，即得試劑R1；

（2）試劑R2的制備：?

步驟一：將PCT抗體進行4℃透析，再用緩沖液將PCT抗體稀釋至2mg/ml，得到PCT抗體稀釋液；將聚苯乙烯膠乳微球用蒸餾水離心、洗滌3次；

步驟二：用緩沖液將經(jīng)過步驟一洗滌后的聚苯乙烯膠乳微球稀釋到質(zhì)量濃度為1%，再加入質(zhì)量濃度為0.01%-0.1%的EDC，在室溫下攪拌反應30min，反應結束后15000rpm離心洗滌以除去未反應的EDC，然后加入步驟一得到的PCT抗體稀釋液，室溫下攪拌反應30min，再加入終止液終止反應，將得到的反應液15000rpm離心，用緩沖液2洗滌沉淀，重復離心洗滌3次，最后加入緩沖液2、防腐劑、穩(wěn)定劑、保護劑攪拌混合均勻即得試劑R2。