[發(fā)明專(zhuān)利]一種調(diào)控油脂酵母發(fā)酵產(chǎn)生的微生物油脂的脂肪酸組成的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310595286.8
• 申請(qǐng)日: 2013-11-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103642858A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳新德;黃超;陳雪芳;熊蓮;張海榮;郭海軍;林曉清;王波;楊會(huì)娟
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院廣州能源研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12P7/64
• 分類(lèi)號(hào): C12P7/64;C12R1/645;C12R1/85
• 代理公司: 廣州科粵專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 莫瑤江

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及生物化工領(lǐng)域，具體涉及一種調(diào)控油脂酵母發(fā)酵產(chǎn)生的微生物油脂的脂肪酸組成的方法。

背景技術(shù)：

微生物油脂，又稱(chēng)單細(xì)胞油脂(Single?Cell?Oil,SCO)，是指由微生物在一定條件下合成并儲(chǔ)存在菌體內(nèi)的甘油脂，其脂肪酸組成與一般的植物油脂相似，主要是C₁₆、C₁₈系脂肪酸，如棕櫚酸、硬脂酸、油酸和亞麻酸等。某些微生物如細(xì)菌、酵母、霉菌、微藻能夠利用碳水化合物、碳?xì)浠衔锖推胀ㄓ椭鳛樘荚捶e累大量油脂，如果油脂積累量能超過(guò)細(xì)胞干重的20%的微生物，即稱(chēng)為產(chǎn)油微生物(Oleaginous?microorganisms)。

長(zhǎng)期以來(lái)，微生物油脂作為一種重要的油脂原料，一直是生物化工重要的研究對(duì)象。微生物油脂可以用作食品上重要油脂的替代品(如可可脂等)，還可以提供有益人類(lèi)健康的各類(lèi)功能性油脂，最近，微生物油脂還被用于生物柴油的原料。總體而言，微生物油脂的油脂脂肪酸組成決定了微生物油脂的用途。通過(guò)現(xiàn)代分子生物學(xué)手段可以改變菌株油脂的結(jié)構(gòu)與組成，但基因改造一般周期較長(zhǎng)，且對(duì)于油脂微生物，有效的生物分子信息不多。因此，尋找一種簡(jiǎn)單、高效、周期短的微生物油脂改造方法十分重要。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的是提供一種調(diào)控油脂酵母發(fā)酵產(chǎn)生的微生物油脂的脂肪酸組成的方法。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的：

一種調(diào)控油脂酵母發(fā)酵產(chǎn)生的微生物油脂的脂肪酸組成的方法，包括以下步驟:

a、在適合油脂酵母油脂發(fā)酵的發(fā)酵培養(yǎng)基中添加C1～C5的短鏈水溶性有機(jī)酸，得到含有短鏈水溶性有機(jī)酸的發(fā)酵培養(yǎng)基；所述短鏈水溶性有機(jī)酸的添加量為1-30g/L；

b、油脂酵母在步驟a得到的含有短鏈水溶性有機(jī)酸的發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行油脂發(fā)酵，培養(yǎng)溫度20-35℃，初始發(fā)酵pH為4.5-9.0，油脂酵母的接種體積跟發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為1-20%；

c、發(fā)酵后通過(guò)有機(jī)溶劑提取微生物油脂，從而獲得脂肪酸組成改變的微生物油脂。

所述適合油脂酵母油脂發(fā)酵的發(fā)酵培養(yǎng)基包括適合油脂酵母油脂發(fā)酵的一切天然培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基與合成培養(yǎng)基（參見(jiàn)文獻(xiàn)Huang?et?al.,Biotechnology?Advances,2013,31,129-139;Papanikolaou?et?al.,European?Journal?of?Lipid?Science?and?Technology,113,1031-1051）。

所述C1～C5的短鏈水溶性有機(jī)酸優(yōu)選為乙酸、甲酸、丁酸或乙酰丙酸。

所述油脂酵母選自皮狀絲孢酵母、粘紅酵母、圓紅冬孢酵母、斯達(dá)油脂酵母、淺白隱球酵母、解脂亞羅酵母、Trichosporon?dermatis、Trichosporon?coremiiforme中的任一種。

所述微生物油脂的提取方法為適合油脂酵母的油脂提取方法為現(xiàn)有技術(shù)，如專(zhuān)利號(hào)為201210132659.3所公開(kāi)的方法，有機(jī)溶劑選自氯仿/甲醇、正己烷/甲醇或者石油醚/甲醇等親疏水性?xún)上嗳軇?/p>

本發(fā)明提供了一種調(diào)控油脂酵母發(fā)酵產(chǎn)生的微生物油脂的脂肪酸組成的方法，不依靠分子生物學(xué)手段、簡(jiǎn)單可行，避免了使用分子生物學(xué)手段改造油脂酵母發(fā)酵產(chǎn)生的微生物油脂脂肪酸組成需要較長(zhǎng)的改造周期。

具體實(shí)施方式：

以下是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，而不是對(duì)本發(fā)明的限制。

實(shí)施例1：

種子培養(yǎng)基(g/L)：木糖20，蛋白胨10，酵母抽提物10，pH6.0。

含有甲酸的發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L)：葡萄糖2.9，木糖37.9，阿拉伯糖4.9，蛋白胨1.8，酵母抽提物0.5，MgSO₄·7H₂O0.3，KCl0.4，MnSO₄·H₂O0.003，CuSO₄·5H₂O0.003，甲酸18；pH7.0。

對(duì)照組發(fā)酵培養(yǎng)基中不添加任何有機(jī)酸。

接種2或3環(huán)皮狀絲孢酵母到裝有50mL的活化后的種子培養(yǎng)基的250mL錐形瓶中，在28℃下150r/min培養(yǎng)24h，得到強(qiáng)壯的種子液。將跟發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為5%的種子液接種于裝有50mL含有甲酸的發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL錐形瓶中，28℃培養(yǎng)8天。發(fā)酵后通過(guò)有機(jī)溶劑提取微生物油脂。