[發明專利]一種量子點標記包膜病毒核衣殼的方法無效
| 申請號： | 201310592905.8 | 申請日： | 2013-11-22 |
| 公開（公告）號： | CN103555681A | 公開（公告）日： | 2014-02-05 |
| 發明（設計）人： | 龐代文;文莉;林毅;張志凌;王漢中 | 申請（專利權）人： | 武漢大學 |
| 主分類號： | C12N7/01 | 分類號： | C12N7/01;C12Q1/70;C12R1/93 |
| 代理公司： | 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 汪俊鋒 |
| 地址： | 430072 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 量子 標記 包膜 病毒 核衣殼 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種量子點標記包膜病毒核衣殼的方法，其特征在于，包括如下步驟：
1)?將融合了生物素受體肽序列的衣殼蛋白序列和催化受體肽生物素化的酶序列同時插入到病毒全基因組，得到重組病毒質粒；
2)?用重組病毒質粒轉染宿主細胞，細胞全部出現病變時收集細胞上清液并純化和濃縮得到重組病毒；
3)?將重組病毒與細胞裂解液孵育至病毒液開始由渾濁變澄清，得到脫去部分包膜的病毒；
4)?將偶聯有鏈酶親和素的量子點與部分脫膜的重組病毒孵育以標記病毒，純化得到核衣殼標記了量子點的包膜病毒。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，對標記了量子點的病毒的純化通過蔗糖密度梯度離心實現。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的酶序列為BirA酶序列。
4.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述包膜病毒為桿狀病毒，宿主細胞為Sf9細胞。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，將濃縮的重組桿狀病毒在含有0.8%?NP40的10?mM?pH?8.5的Tris緩沖溶液中孵育15?min，得到脫去部分包膜的桿狀病毒。
6.根據權利要求4或5所述的方法，其特征在于，將2?nM?偶聯有鏈霉親和素的量子點與脫去部分包膜的重組桿狀病毒在4°C下孵育30分鐘，實現量子點對重組桿狀病毒核衣殼的標記。
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