[發明專利]一種定量檢測絲氨酸的方法

有效

• 申請號: 201310591734.7
• 申請日: 2013-11-22
• 公開（公告）號: CN103674873A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 繆劉;許首芳;余琳;王軼雄
• 申請（專利權）人: 杭州利安生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 林松海

1.一種定量檢測絲氨酸的方法，其特征在于，絲氨酸樣品經過胱硫醚裂解酶（CBL）作用后生成丙酮酸、氨和硫代半胱氨酸，通過測定生成丙酮酸的含量，定量得到樣品中絲氨酸的含量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的丙酮酸的含量的測定方法為乳酸脫氫酶法，丙酮酸和NADH在LD，pH7.4，作用下生成乳酸和NAD⁺，通過測定340nm?波長處NADH下降速率，得到丙酮酸含量。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，具體步驟如下：

????1）、配置相關試劑：

A、0.5mmol/L絲氨酸標準應用液，

B、R₁：20mmol/L?HEPES緩沖液，33?KU/L?LD，8.9KU/L?CBL，pH?7.4，

C、R₂：50mmol/L?Tris，0.416?mmol/L?NADH，pH?7.4；

????2）、根據自動化分析儀的型號、性能設定參數，溫度：37℃；波長：340nm；樣品和標準品各25μL，5s后加R₁100μL，10s后加R₂50μL，每隔28s檢測OD₃₄₀，分別測定樣品管和標準管吸光度的下降速率；

???3）、計算???????????????????????????????????????????????，?A_u是樣品管吸光度的下降速率，?A_s是標準管吸光度的下降速率。