[發明專利]一種對葡萄糖氧化酶進行發酵的工藝

在審

• 申請號: 201310588356.7
• 申請日: 2013-11-21
• 公開（公告）號: CN103642764A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發明（設計）人: 周懂懂
• 申請（專利權）人: 周懂懂
• 主分類號: C12N9/04
• 分類號: C12N9/04;C12R1/685
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生化物質的制備方法，具體來說，是指一種對葡萄糖氧化酶進行發酵的工藝。?

背景技術

葡萄糖氧化酶(?G?l?u?c?o?s?eOxidase，簡稱GOD)系統名為β-D-葡萄糖：氧化還原酶(EC1.1.3.4)它能專一地將β?-D-?葡萄糖氧化成葡萄糖酸和過氧化氫。葡萄糖氧化酶是酶技術領域中一種非常重要的酶，由于葡萄糖氧化酶與生命重要物質葡萄糖和氧的密切關系，導致了它在科研、醫藥和食品工業生產上廣泛的應用。20?世紀初Maximou?在黑曲霉培養物中發現吸氧酶系統。1924年Malliard發現了葡萄糖酸。1928年，Muller?用黑曲霉菌絲體壓制進行葡萄糖酸形成的酶學研究，探明在葡萄糖存在時能消耗氧，并命名為葡萄糖氧化酶，把它歸入脫氫酶。以后許多研究者對該酶的性質作了大量的工作，尤其對葡萄糖氧化酶的輔基一黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)作了深入的研究，并給予詳細的說明。BentleyNeubergar?應用同位素18O2·218O明確了在有過氧化氫酶存在下的一系列試驗。Keilin等對黑曲霉的葡萄糖氧化酶的動力學及其作用形式也作了較詳細的研究。1961年國際生化協會酶委員會將該酶的系統名稱叫做(β-D-萄萄糖-氧化還原酶(EC1.1.3.4)。?

發明內容

為克服上述技術問題，我們提出了以下技術方案：?

一種對葡萄糖氧化酶進行發酵的工藝，具體步驟如下：

選用黑曲霉作為發酵生產葡萄糖氧化酶的出發菌株，對其進行紅外線的誘變處理；

篩選，得到高產菌株；

連續3-5次對其進行傳代實驗，得到遺傳性狀穩定的菌株；

放置于培養基中進行培養；

運用雙層紗膜進行透析；

常規發酵，至少24小時；

轉移至發酵罐中，密封至少12小時；

再次進行傳代實驗，3-5次，即可。

本發明中，所述發酵罐的體積必須與發酵物相當，體積不得超過其體積的百分之十。?

本發明中，可以用麥芽糖替代黑曲霉。?

本發明的有益效果是：產酶反應活度高，變化比較平穩，有效減少了發酵過程中代謝物的產生以及其對產物合成的阻礙作用。?

具體實施方式

一種對葡萄糖氧化酶進行發酵的工藝，具體步驟如下：?

選用黑曲霉作為發酵生產葡萄糖氧化酶的出發菌株，對其進行紅外線的誘變處理；

篩選，得到高產菌株；

連續5次對其進行傳代實驗，得到遺傳性狀穩定的菌株；

放置于培養基中進行培養；

運用雙層紗膜進行透析；

常規發酵，24小時；

轉移至發酵罐中，密封12小時；

再次進行傳代實驗，3次，即可。

所述發酵罐的體積必須與發酵物相當，體積為其體積的百分之十。?

以上所述，僅為本發明較佳的具體實施方式，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明披露的技術范圍內，根據本發明的技術方案及其發明構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。?