[發明專利]粉葛組織培養快速育苗方法

有效

• 申請號: 201310585519.6
• 申請日: 2013-11-19
• 公開（公告）號: CN103598098A
• 公開（公告）日: 2014-02-26
• 發明（設計）人: 鐘宇;張魯;余長春;鄭陽霞;萬學琴;張健;李賢偉;馮茂松
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 龔燮英

1.一種粉葛組織培養快速育苗方法，其特征在于：包括如下步驟：

（1）預處理將優株塊根進行盆栽，放置在溫室大棚中，待其發出芽藤蔓長至20cm，開始噴灑1%多菌靈溶液，每周一次，持續一個半月，藤蔓長至1m時開始取材；

（2）無菌材料體系的建立選取當年生粉葛葛藤，剪去葉片和葉柄，切割成1.0～1.5cm長帶有腋芽的莖段，將帶芽莖段置于自來水下沖洗30min，然后用洗衣粉液浸泡10～30min，用軟刷刷洗莖段后再置流水下沖洗1～2h，在超凈工作臺上，將洗滌好的莖段用質量濃度為75％酒精浸泡15～20s，無菌水沖洗2～4次，然后用0.1％的氯化汞浸泡3～5min，無菌水沖洗4～6次再用2%次氯酸鈉處理8～10min，無菌水沖洗4～6次，用濾紙吸干帶芽莖段獲得無菌材料；

（3）誘導培養將上述步驟獲得的無菌帶芽莖段先接種到1/2MS培養基上，黑暗條件下培養10～15d，減少褐化發生，然后轉入芽誘導培養基上促進腋芽的萌發和生長，按光照和黑暗時間比為2:1交替進行誘導培養；

（4）芽的增殖芽誘導培養25±2d，腋芽萌發生長至1～1.5cm，將其全部轉入增殖培養基進行反復增殖，獲得大量的增殖苗后轉入生根培養；

（5）生根培養從增殖培養中選取2～3cm的芽進行生根培養；

（6）煉苗移栽將生根培養的組培苗從培養室取出，將培養瓶移到溫室中進行強光閉瓶練苗6～8d，然后打開瓶口，在瓶內加入PP₃₃₃與多菌靈混合液，防止細菌污染以及促進壯苗，再放置7～10d，煉苗完成后，用鑷子將試管苗輕輕取出，放入清水盆中，小心洗去根部瓊脂，然后澇出，用多菌靈處理后移栽至營養土中，營養土上層為2cm河沙，下層為4cm珍珠巖、蛭石及腐殖質混合物，待有新葉長出后按常規苗圃育苗措施管理。

2.根據權利要求1所述粉葛組織培養快速育苗方法，其特征在于：所述粉葛選自大巴山粉葛。

3.根據權利要求1所述粉葛組織培養快速育苗方法，其特征在于：所述步驟（3）的誘導培養條件為：溫度24～26℃、光強2500lx、濕度70%。

4.根據權利要求1所述粉葛組織培養快速育苗方法，其特征在于：所述步驟（3）的誘導培養基含有MS基礎培養基+0.5～1.0mg/L6-BA+0.1～0.3mg/L?IBA+蔗糖30g/L+瓊脂7.0g/L。

5.根據權利要求1所述粉葛組織培養快速育苗方法，其特征在于：所述步驟（4）的增殖培養基含有MS基礎培養基+0.3～0.5mg/L6-BA+0～0.1mg/L?IBA+蔗糖30g/L+瓊脂7.0g/L。

6.根據權利要求1所述粉葛組織培養快速育苗方法，其特征在于：所述步驟（5）的生根培養基含有1/2MS基礎培養基+0～0.1mg/L?IBA+蔗糖30g/L+瓊脂7.0g/L。

7.根據權利要求4～6任一項所述粉葛組織培養快速育苗方法，其特征在于：所述培養基的pH為5.8～6.0。

8.根據權利要求1所述粉葛組織培養快速育苗方法，其特征在于：所述步驟（5）煉苗移栽時空氣溫度為20～25℃，濕度為85%。