[發(fā)明專利]三倍體丹參脫毒新品種的快速選育方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310582544.9
• 申請日: 2013-11-20
• 公開（公告）號: CN103583367A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳瑞陽
• 申請（專利權(quán)）人: 陳瑞陽
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01H1/04
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 王小靜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種植物新品種的選育方法，特別是三倍體丹參脫毒新品種（系）的快速選育方法。

背景技術(shù)

丹參（Salvia?miltiorrhiza?Bunge）是我國傳統(tǒng)醫(yī)藥中應(yīng)用最早、最廣泛的中藥之一，是著名的活血化淤藥，在臨床上被廣泛用于治療冠心病、心絞痛、缺血性中風(fēng)等疾病。隨著我國人口老齡化，心血管疾病成為危害人類健康的主要疾病，發(fā)病率逐年上升，對藥物需求量增大。目前我國以丹參為原料生產(chǎn)的復(fù)方中藥有100多種，對優(yōu)質(zhì)丹參藥材的需求量巨大。自上世紀(jì)60～70年代，各地野生丹參轉(zhuǎn)變家種成功后，生產(chǎn)有了較大發(fā)展，1978年收購4?000噸，銷售6500噸，2007年產(chǎn)量達(dá)23000～24000噸，已成為一種重要的栽培藥用植物。最近，中藥界普遍把丹參視為中藥的“模式中藥”，中國科學(xué)院藥用植物研究所還啟動了丹參基因組測序工作，突顯了丹參作為傳統(tǒng)中藥研究的地位。然而，隨著栽培丹參的發(fā)展，凸顯我國丹參遺傳改良與新品種培育中的問題，主要有：①與其它栽培作物相比栽培丹參尚處在起步階段，目前我國還沒有一個通過雜交選育出來的丹參新品種，現(xiàn)有栽培丹參都是由野生直接變家種來，野生、半野生、栽培丹參之間的遺傳相似系數(shù)在0.75～0.8之間，說明我國栽培丹參中很少有變異的積累-人工選擇；②現(xiàn)在全國還沒有一個公認(rèn)的丹參主栽品種，只有四川從現(xiàn)有混雜的川丹參群體中經(jīng)過系統(tǒng)篩選分離純化出了大葉型（SA）和小葉型（SI）兩個品種。因此，我國丹參的遺傳改良與新品種培育勢在必行，尋找一條有效的丹參新品種培育方法已是當(dāng)務(wù)之急。近年來很多單位都已開展了有關(guān)丹參雜交育種及其相關(guān)的基礎(chǔ)研究。高山林（2006）最先培育了丹參四倍體新品種，丹參產(chǎn)量提高了50%，有效化學(xué)成分提高了50～80%。江蘇省從栽培品種混合種植的天然雜交當(dāng)代（F1）中選出皺葉、單葉、小葉和原型4個品系新材料，正在擴(kuò)大種植。河南省從裕丹參變異群體中已選出5個變異類型。山東省在對丹參開花與繁育特性研究的基礎(chǔ)上，提出直接利用丹參的自然變異進(jìn)行系統(tǒng)育種是丹參初期最有效的育種方法。陜西省已篩選到丹參雄性不育系Sh-B的三個不育類型Sh-B1、Sh-B2、Sh-B3。然而，至今尚未見丹參雜交育種取得突破性進(jìn)展。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供的是一種三倍體丹參脫毒新品種的快速培育方法，可以克服常規(guī)新品種選育周期長，需要5-8年的缺陷。本發(fā)明選育周期只需2年。它是建立在本項發(fā)明人早先發(fā)明的“丹參三倍體培育方法”的基礎(chǔ)上，將產(chǎn)生變異的三倍體丹參或由于外界脅迫造成品種退化的三倍體丹參的體細(xì)胞作為外植體，采用組織培養(yǎng)快繁與脫毒技術(shù)相結(jié)合的方法，將其快速繁殖起來。不但第二年就可進(jìn)行新品種比較試驗，而且經(jīng)過脫毒處理，恢復(fù)了三倍體丹參本來就存在的多倍體優(yōu)勢和雜種優(yōu)勢，三倍體丹參脫毒新品種表現(xiàn)生長旺盛（圖5），藥材產(chǎn)量和藥物有效成分都能獲得顯著提高。

本發(fā)明提供的是一種三倍體丹參脫毒新品種的選育方.法，包括以下步驟：以三倍體丹參莖尖或新生幼葉為外植體，先進(jìn)行脫毒處理，然后進(jìn)行組織培養(yǎng)快繁。要使瓶苗達(dá)到一定數(shù)量，第2年就可進(jìn)行三倍體丹參脫毒新品種評比試驗，選育出藥材產(chǎn)量提高20％以上，藥物有效成分丹酚酸B和丹參酮ⅡA提高0.5-1倍以上，綜合生物性狀好的三倍體丹參脫毒新品種。

本發(fā)明提供的是一種三倍體丹參脫毒新品種的選育方法，包括以下步驟：

⑴取材：以下3種材料來源之一，均可進(jìn)行三倍體丹參毒新品種的選育工作：①在三倍體丹參大田中新發(fā)現(xiàn)的變異植株莖尖或新生幼葉（圖1）；②三倍體丹參雜交（2x♀×4x♂或4x♀×2x♂）當(dāng)代種子幼苗莖尖或幼葉；③大田生產(chǎn)種植8年以上的三倍體丹參莖尖或新生幼葉；

⑵脫毒處理：在無菌操作條件下先用75％酒精消毒1分鐘，再用0.1％升汞消毒10分鐘，無菌蒸餾水沖洗5遍；

⑶光照培養(yǎng)：在光照周期14小時/天，光強(qiáng)度3000Lux，室溫20-25℃條件下進(jìn)行培養(yǎng)；

⑷擴(kuò)大繁殖：待叢生芽生長出1-2片葉時，進(jìn)行分瓶擴(kuò)大繁殖，每瓶分裝3-5棵苗；

⑸瓶苗移栽：待瓶苗長出新根，根長3-5公分時，進(jìn)行瓶苗移栽。移栽前2天打開瓶蓋進(jìn)行練苗；

⑹移栽苗管理：剛移出的瓶苗要加強(qiáng)管理，成活率可達(dá)90％以上；

⑺三倍體丹參脫毒新品系（種）品種評比試驗：按常規(guī)新品種評比試驗要求進(jìn)行，每個新選育出來的三倍體丹參脫毒新品（種）大田種植面積要達(dá)到2-3畝；

⑻三倍體丹參脫毒新品系（種）主要藥物有效成分測定：按《藥典》規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，測定丹參酮ⅡA和隱丹參酮含量。