[發明專利]三倍體丹參脫毒新品種的快速選育方法

有效

• 申請號: 201310582544.9
• 申請日: 2013-11-20
• 公開（公告）號: CN103583367A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發明（設計）人: 陳瑞陽
• 申請（專利權）人: 陳瑞陽
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01H1/04
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 王小靜

1.一種三倍體丹參脫毒新品系（種）的快速選育方法，其特征在于包括以下步驟：

⑴取材，選自：①在三倍體丹參大田中新發現的變異植株莖尖或新生幼葉（圖1）；②三倍體丹參雜交（2x♀×4x♂或4x♀×2x♂）當代種子幼苗莖尖或幼葉；③大田生產種植8年以上的三倍體丹參莖尖或新生幼葉；

⑵脫毒處理：在無菌操作條件下，進行材料的脫毒處理；

⑶組織培養：按無菌操作程序，將材料接種在1/2MS培養基上，在20-25℃，光強度3000Lux，光周期14小時/天條件下進行培養，20天后在葉緣切割面可分化出叢生芽；

⑷組培苗克隆繁殖：待叢生芽分化出幼葉時，進行分瓶擴大繁殖，每瓶以3-5棵苗為宜；

⑸瓶苗移栽：待新根3-5公分時進行瓶苗移栽，移栽前2-3天先打開瓶蓋練苗；

⑹移栽苗管理：加強移栽苗管理；

⑺三倍體丹參脫毒新品種評比試驗：按通常三倍體丹參大田種植方法進行田間栽培管理；

⑻三倍體丹參脫毒新品系（種）主要藥物有效成分測定：按《中華人民共和國藥典》規定，對三倍體丹參脫毒新品系（種）丹參酮ⅡA、丹酚酸B和隱丹參酮進行測定；

⑼三倍體丹參脫毒新品種的確定：根據三倍體丹參脫毒新品種藥材產量和主要藥物有效成分含量測定結果，最后確定三倍體丹參脫毒新品種的選育結果。

2.一種三倍體丹參脫毒新品種的快速選育方法，其特征在于包括以下步驟：

⑴取材：選自以下三種材料來源之一：①在三倍體丹參種植大田中新發現的變異植株的莖尖或新生幼葉；②三倍體丹參雜交（2x♀×4x♂或4x♀×2x♂）當代種子幼苗之新生幼葉；③大田栽培生產8年以上三倍體丹參植株莖尖或新生幼葉；按無菌操作程序，在超凈工作臺上，用解剖刀切取1-2平方厘米大小的葉片，進行脫毒處理；

⑵脫毒處理：在超凈臺內將切取的材料先用75％酒精消毒1分鐘，再用0.1％升汞消毒10分鐘，無菌蒸餾水沖洗5遍，將材料接種在1/2MS培養基上，在組織培養室中進行光照培養；

⑶光照培養：⑵所述的光照培養是在周期14小時/天，光強度3000Lux，室溫20-25℃條件下進行培養；在上述條件下培養，經過20天沿接種材料切割面會產生大量叢生芽；

⑷擴大繁殖：待⑶所述的叢生芽生長出1-2片葉時，進行分瓶擴大繁殖，每瓶分裝3-5棵苗；

⑸瓶苗移栽：待瓶苗長出新根，根長3-5公分時，進行瓶苗移栽；移栽前2天打開瓶蓋進行練苗；

⑹移栽苗管理：剛移出的瓶苗要半遮光，保持50-70％的濕度，成活率達90％以上；

⑺三倍體丹參脫毒新品種品種評比試驗：按常規新品種評比試驗要求進行，每個新選育出來的三倍體丹參脫毒新品種大田種植面積要達到1.5-3畝地；

⑻三倍體丹參脫毒新品種主要藥物有效成分含量測定：按《中華人民共和國藥典》規定標準，測定丹參酮ⅡA、丹酚酸B和隱丹參酮含量；

⑼三倍體丹參脫毒新品種的確定：根據三倍體丹參脫毒新品系大田種植藥材產量和主要藥物有效成分含量測定，最后確定三倍體丹參脫毒新品種的選育結果。

3.按照權利要求2所述的快速選育方法，其特征在于所述的取材是選取三倍體丹參種植大田中新發現的變異植株的莖尖或新生幼葉。

4.按照權利要求2所述的快速選育方法，其特征在于步驟③要保持光照培養室的濕度在50％，并保持通風和清潔衛生。

5.按照權利要求2所述的快速選育方法，其特征在于步驟④擴大繁殖數量為15000棵。

6.按照權利要求2所述的快速選育方法，其特征在于步驟⑸所述的瓶苗移栽方法為：移栽前要把培養基洗凈，移栽的基質要事先經滅菌靈消毒堆肥發酵處理過的磨菇泥渣與砂土按3：1混合基質，每個營養缽移栽一棵苗。

7.按照權利要求2所述的快速選育方法，其特征在于步驟⑦所述的評比試驗設三亇重復，每個重復1畝地，每畝5000棵苗。

8.按照權利要求2所述的快速選育方法，其特征在于步驟⑻主要藥物有效成分測定，丹參酮ⅡA不得少于0.2％，丹酚酸B不得少于3.0％。

9.按照權利要求2所述的快速選育方法，其特征在于步驟⑼所述的三倍體丹參脫毒新品種的確定：藥材產量增產20％以上，丹參酮ⅡA提高1倍以上，丹酚酸B提高0.5倍以上。