[發明專利]白芨種莖的生產方法

無效

• 申請號: 201310579744.9
• 申請日: 2013-11-19
• 公開（公告）號: CN103583365A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發明（設計）人: 毛堂芬;陳婭婭;王沁;劉作易
• 申請（專利權）人: 貴州省生物技術研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 李亮;程新敏

1.一種白芨種莖的生產方法，其特征在于：包括如下步驟：

1）外植體的處理及接種：在9-10月采集白芨蒴果，用水沖洗干凈表面灰塵，自然晾干后，在超凈工作臺上用質量百分比濃度為75％的酒精浸泡消毒30?s，再用0.1%升汞液浸泡消毒8?min，然后用無菌水清洗5次后，再用無菌的濾紙將白芨蒴果表面的水分吸干，將白芨蒴果內的種子取出后，均勻的撒播到種子萌發培養基的表面，在培養室中培養，培養溫度為25±2℃，光照強度為1500-2000Lx，光照時間為12h/d；所述的萌發培養基的主體為1/2MS培養基，其中NAA為0.5mg/L，6-BA為1.0?mg/L，白糖的質量百分比為3%，瓊脂粉的質量百分比為0.7%，pH為5.8；

2）原球莖的獲得與增殖：種子培養10天后，形成黃色原球莖，在原球莖未分化出葉片時轉接到增殖培養基中，放置于溫度為25±2℃的培養室培養，光照強度1500-2000Lx，光照時間12h/d，培養25天后，形成叢生形原球莖；所述的增殖培養基的主體為MS培養基，其中NAA為0.2mg/L，6-BA為0.5?mg/L，白糖的質量百分比為3%，瓊脂粉的質量百分比為0.7%，pH為5.8；

3）原球莖分化成苗：將叢生形原球莖轉接于分化培養基中，置25±2℃的培養室、光照強度1500-2000Lx、光照時間12h/d條件培養,至培養獲得2-3片葉的植株；所述的分化培養基的主體為MS培養基，其中NAA為0.3mg/L，白糖的質量百分比為3%，瓊脂粉的質量百分比為0.7%，pH為5.8；

4）試管球莖的獲得：將步驟3）獲得的植株轉接于生根培養基中，在溫度為25±2℃的培養室培養，光照強度1500-2000Lx，光照時間12h/d，培養45-60天后，獲得試管球莖；所述的生根培養基的主體為MS培養基，其中NAA為0.5mg/L，6-BA為0.1mg/L，白糖的質量百分比為3%，瓊脂粉的質量百分比為0.7%，pH為5.8；

5）一級種莖的獲得：將形成有試管球莖的培養瓶放在室溫下放置3天，然后揭開封口膜煉苗2天，用鑷子將瓶中的試管球莖夾出，在自來水下沖洗掉培養基，并清理干凈枯葉及根，栽種于準備好的蛭石和細樹皮的混合基質中，蛭石和細樹皮的體積比為4:1，細樹皮粒徑小于1cm，澆淋透1000倍多菌靈液，然后按照常規管理，待發新芽時開始每半月噴施一次營養液；待生長期結束，葉片枯黃脫落，采收地下部的白芨球莖，即獲得一級種球莖；

6）二級種莖：當氣溫回升時，將獲得的一級種莖種植在蛭石、腐殖土和細樹皮混合的基質中，蛭石、腐殖土和細樹皮的體積比為3:1:1，細樹皮粒徑小于1cm，淋透1000倍多菌靈液，按照常規管理；待種莖發出新芽時開始每半月噴施一次營養液，待葉片枯黃脫落時，采收地下部白芨球莖，獲得作為栽培生產用種莖的二級種莖。