[發(fā)明專利]白芨種莖的生產(chǎn)方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310579744.9
• 申請日: 2013-11-19
• 公開（公告）號: CN103583365A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛堂芬;陳婭婭;王沁;劉作易
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州省生物技術(shù)研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務(wù)所 52100
• 代理人: 李亮;程新敏

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種白芨種莖的生產(chǎn)方法。

背景技術(shù)

白芨「Bletilla?striata（Thunb.）Reichb.f.〕為蘭科白芨屬多年生草本植物，別名白根、白雞娃、連芨草、紫蘭等，是一種常用大宗藥材，以干燥塊莖入藥，其性微寒，味苦、甘、澀，歸肺、胃、肝經(jīng)，具有補肺止血、消腫生肌等功能，主治肺結(jié)核咳血、支氣管擴張咯血、胃潰瘍吐血、尿血、便血等癥；外用治外傷出血、燒燙傷、手足皸裂等癥；另白芨含較高的白芨膠，可作為混懸劑及乳化劑，在食品及化工領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用；且在生物醫(yī)藥、保健食品、美容業(yè)、紡織印染、特種涂料和日用化工等方面也被廣泛應(yīng)用。白芨花色艷麗，可作漂亮的觀賞植物。白芨主產(chǎn)于四川、貴州、云南、陜西、甘肅等省。

白芨生于高山和丘陵地區(qū)的山坡草叢、疏林及山谷陰濕處或溝谷巖石縫中，喜溫暖、陰涼濕潤的環(huán)境；葉2-6枚，互生，狹長圓狀披針形至線狀披針形，葉片與葉柄之間具關(guān)節(jié)，葉柄互相卷抱成莖狀，花序頂生，總狀，常具數(shù)朵花，通常不分枝或極罕見分枝、花具有紫紅色、粉紅色、黃色或白色，萼片與花瓣相似，近等長，離生；唇瓣中部以上明顯3裂，側(cè)裂片直立，花粉團8個，成2群，每室4個，粒粉質(zhì)，柱頭1個，位于蕊喙之下，茹果長圓狀紡錘形，直立，果期7-9月。該屬植物有膨大地下塊莖，呈三角狀扁球形或規(guī)則菱形，其近旁常具多枚前一年和以前每年所殘留的假鱗莖。

長期以來，白芨市場主要依靠野生資源。由于用途的廣泛、需求量的增加以及價格的高漲，導致資源被掠奪式采挖，加上生態(tài)環(huán)境的破壞，野生資源日漸枯竭，白芨已成為我國二級保護植物。

采用人工繁育是滿足白芨市場的有力措施，但種源成為發(fā)展的“瓶頸”。白芨種子在自然條件下播種繁殖困難，塊莖分切繁殖較容易，但需種量大，繁殖系數(shù)低，抗病害能力差，會逐年退化，難以滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是：提供一種白芨種莖的生產(chǎn)方法，它克服了白芨組培苗直接煉苗成活率低的問題，解決了白芨人工規(guī)模化種植的種源問題，為白芨的持續(xù)發(fā)展及開發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：白芨種莖的生產(chǎn)方法，包括如下步驟：

1）外植體的處理及接種：在9-10月采集白芨蒴果，用水沖洗干凈表面灰塵，自然晾干后，在超凈工作臺上用質(zhì)量百分比濃度為75％的酒精浸泡消毒30?s，再用0.1%升汞液浸泡消毒8?min，然后用無菌水清洗5次后，再用無菌的濾紙將白芨蒴果表面的水分吸干，將白芨蒴果內(nèi)的種子取出后，均勻的撒播到種子萌發(fā)培養(yǎng)基的表面，在培養(yǎng)室中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25±2℃，光照強度為1500-2000Lx，光照時間為12h/d；所述的萌發(fā)培養(yǎng)基的主體為1/2MS培養(yǎng)基，其中NAA為0.5mg/L，6-BA為1.0?mg/L，白糖的質(zhì)量百分比為3%，瓊脂粉的質(zhì)量百分比為0.7%，pH為5.8；

2）原球莖的獲得與增殖：種子培養(yǎng)10天后，形成黃色原球莖，在原球莖未分化出葉片時轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，放置于溫度為25±2℃的培養(yǎng)室培養(yǎng)，光照強度1500-2000Lx，光照時間12h/d，培養(yǎng)25天后，形成叢生形原球莖；所述的增殖培養(yǎng)基的主體為MS培養(yǎng)基，其中NAA為0.2mg/L，6-BA為0.5?mg/L，白糖的質(zhì)量百分比為3%，瓊脂粉的質(zhì)量百分比為0.7%，pH為5.8；

3）原球莖分化成苗：將叢生形原球莖轉(zhuǎn)接于分化培養(yǎng)基中，置25±2℃的培養(yǎng)室、光照強度1500-2000Lx、光照時間12h/d條件培養(yǎng),至培養(yǎng)獲得2-3片葉的植株；所述的分化培養(yǎng)基的主體為MS培養(yǎng)基，其中NAA為0.3mg/L，白糖的質(zhì)量百分比為3%，瓊脂粉的質(zhì)量百分比為0.7%，pH為5.8；

4）試管球莖的獲得：將步驟3）獲得的植株轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基中，在溫度為25±2℃的培養(yǎng)室培養(yǎng)，光照強度1500-2000Lx，光照時間12h/d，培養(yǎng)45-60天后，獲得試管球莖；所述的生根培養(yǎng)基的主體為MS培養(yǎng)基，其中NAA為0.5mg/L，6-BA為0.1mg/L，白糖的質(zhì)量百分比為3%，瓊脂粉的質(zhì)量百分比為0.7%，pH為5.8；

5）一級種莖的獲得：將形成有試管球莖的培養(yǎng)瓶放在室溫下放置3天，然后揭開封口膜煉苗2天，用鑷子將瓶中的試管球莖夾出，在自來水下沖洗掉培養(yǎng)基，并清理干凈枯葉及根，栽種于準備好的蛭石和細樹皮的混合基質(zhì)中，蛭石和細樹皮的體積比為4:1，細樹皮粒徑小于1cm，澆淋透1000倍多菌靈液，然后按照常規(guī)管理，待發(fā)新芽時開始每半月噴施一次營養(yǎng)液；待生長期結(jié)束，葉片枯黃脫落，采收地下部的白芨球莖，即獲得一級種球莖；