[發(fā)明專利]抑癌基因IRX1的saRNA分子及其組合物和其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310574154.7
• 申請日: 2013-11-15
• 公開（公告）號: CN104630219B
• 公開（公告）日: 2019-05-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 于穎彥;潘勝利;朱正綱
• 申請（專利權(quán)）人: 中美瑞康核酸技術(shù)（南通）研究院有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京安杰律師事務(wù)所 11627
• 代理人: 袁沁菲

本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明涉及一抑癌基因IRX1的saRNA分子及其組合物和其應(yīng)用。本發(fā)明公開了一抑癌基因IRX1的saRNA分子，其特征在于其序列與IRX1基因啟動子區(qū)距轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)以上?1781至?2930區(qū)域的序列SEQ ID NO：1互補(bǔ)，增加IRX1基因的表達(dá)。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)了抑癌基因IRX1的saRNA分子，其能有效地激活癌細(xì)胞內(nèi)失活的抑癌基因IRX1，具有抑制癌細(xì)胞增殖的生物學(xué)功效，為腫瘤的基因治療提供了新方法和新分子靶點(diǎn)，對開發(fā)腫瘤的靶向治療新策略具有重要意義，具有潛在臨床應(yīng)用價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明涉及一抑癌基因IRX1的saRNA分子及其組合物和其應(yīng)用。

背景技術(shù)

抑癌基因是一大類可抑制細(xì)胞生長，并潛在抑制癌變的基因群。正常情況下它們對細(xì)胞的發(fā)育、生長和分化起重要調(diào)控作用。染色體上某些位點(diǎn)等位基因的雜合性丟失（LOH）及啟動子區(qū)高甲基化是導(dǎo)致抑癌基因失活的重要分子機(jī)制，如何實現(xiàn)抑癌基因功能復(fù)活是目前腫瘤預(yù)防和治療的一條重要方向。

Iroquois homeobox protein1(IRX1)基因?qū)儆谝茁蹇易逋春谢颍蚨ㄎ挥?號染色體短臂5p15.33區(qū)，已被證實在胃癌和頭頸癌中IRX1發(fā)揮抑癌基因作用(Guo X,et al.Oncogene, 2010.29(27):3908-20；Bennett KL,et al.Cancer Res,2008.68(12):4494-9)。

小分子激活RNA（small activating RNA，saRNA）是新近發(fā)現(xiàn)的靶向基因啟動子DNA序列的雙鏈小RNA分子,由saRNA激活靶基因使之再活化的現(xiàn)象被稱之為RNA激活(RNAactivation,RNAa)。saRNA是通過靶向基因啟動子區(qū)特定序列實現(xiàn)激活靶基因的功效，已有用于抑癌基因的調(diào)控和實驗性治療研究的報道。RNA激活技術(shù)的開發(fā)為以抑癌基因為靶點(diǎn)的實驗研究與靶向治療提供了極其有前景的選擇。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一抑癌基因IRX1的saRNA分子，以激活癌細(xì)胞內(nèi)失活的抑癌基因 IRX1，實現(xiàn)治療腫瘤的目的。

為此，本發(fā)明公開了一抑癌基因IRX1的saRNA分子，其特征在于其序列與IRX1基因啟動子區(qū)距轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)以上-1781至-2930區(qū)域的序列（SEQ ID NO：1）互補(bǔ)，增加IRX1基因的表達(dá)，其中優(yōu)選所述其序列與IRX1基因啟動子區(qū)距轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)以上-1955至-2728區(qū)域的序列（SEQ ID NO：2）互補(bǔ)。

在一些實施例中，所述saRNA分子其序列為SEQ ID NO：3，SEQ ID NO：4，SEQ IDNO： 5，SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：7，或SEQ ID NO：8，其中優(yōu)選為SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：6。

本發(fā)明提供如上所述saRNA用于在執(zhí)行IRX1基因在哺乳動物細(xì)胞中的激活（例如，增加基因的表達(dá)）針對IRX1基因的啟動子序列的區(qū)域。

另一方面，本發(fā)明還公開了一種用于激活I(lǐng)RX1基因的組合物，包括至少第一條核糖核酸鏈，所述第一條核糖核酸鏈，其序列為SEQ ID NO：3，SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5，SEQID NO： 6，SEQ ID NO：7，或SEQ ID NO：8，與IRX1基因啟動子區(qū)距轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)以上區(qū)域的序列（SEQ ID NO：2）互補(bǔ)，增加IRX1基因的表達(dá)。

在某些方面，組合物可以包括第二條核糖核酸鏈，其特征在于，當(dāng)所述第一條核糖核酸鏈序列為SEQ ID NO：3所示，所述第二條核糖核酸鏈序列為SEQ ID NO：4；當(dāng)所述第一條核糖核酸鏈序列為SEQ ID NO：5所示，所述第二條核糖核酸鏈序列為SEQ ID NO：6；當(dāng)?shù)谝缓颂呛怂徭溞蛄袨镾EQ ID NO：7所示，第二個核糖核酸鏈序列為SEQ ID NO：8。