[發明專利]一種泥炭蘚原絲體的獲得及培養方法

有效

• 申請號: 201310573487.8
• 申請日: 2013-11-15
• 公開（公告）號: CN103609443A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 孫越;李澤玲;李小方;朱瑞良
• 申請（專利權）人: 華東師范大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海麥其知識產權代理事務所(普通合伙) 31257
• 代理人: 董紅曼

1.一種泥炭蘚原絲體的獲得及培養方法，其特征在于，以泥炭蘚的莖葉體為原材料，經組織粉碎，在改良的Knop液體培養基中培養，從泥炭蘚組織莖葉體的碎片上長出新的原絲體，將該原絲體進行多次組織粉碎，再在液體培養基中培養，得到所述泥炭蘚原絲體。

2.如權利要求1所述的培養方法，其特征在于，所述泥炭蘚的莖葉體為經過無菌處理后脫毒，并在培養基上繁殖好的無菌的泥炭蘚的莖葉體。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述改良的Knop液體培養基包括：磷酸二氫鉀(KH₂PO₄)250毫克/升，氯化鉀(KCl)250毫克/升，硫酸鎂(MgSO₄.7H₂O)250毫克/升，硝酸鈣(Ca(NO₃)₂.4H₂O)1000毫克/升，硫酸亞鐵(FeSO₄.7H₂O)14毫克/升，pH5.4。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述組織粉碎是在超凈工作臺上使用組織粉碎儀，用滅菌的組織粉碎刀頭將所述泥炭蘚的莖葉體切成碎片；其中，所述碎片的長度為1-3毫米。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述碎片長度為2毫米。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述組織粉碎的初期粉碎時間為10-30秒；后期粉碎時間為30-40秒。

7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述組織粉碎的初期粉碎時間為20秒，后期粉碎時間為30秒。

8.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述培養條件為：18-22℃，搖床轉速120轉/分鐘，24h震蕩，液體pH值為5.4，懸浮培養，光照3500Lux，光照時間16h光照/8h黑暗。

9.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述組織粉碎及泥炭蘚原絲體的培養是連續多次；在前后兩次所述組織粉碎的間隔期間，所述泥炭蘚原絲體的培養時間為7-14天。

10.如權利要求9所述的方法，其特征在于，在第一次組織粉碎后的培養時間為14天，此后的每一次組織粉碎后的培養時間為7天。