[發明專利]一種葉酸受體介導、光響應抗腫瘤藥物偶聯物及其制備方法

無效

• 申請號: 201310567544.1
• 申請日: 2013-11-08
• 公開（公告）號: CN103768614A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發明（設計）人: 張懷紅;孫柏旺;孫玉;倉輝;蔡照勝
• 申請（專利權）人: 鹽城工學院
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61K41/00;A61P35/00
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技術領域

本發明屬于高分子藥物技術領域，具體涉及一種葉酸受體介導、光響應抗腫瘤藥物偶聯物及其制備方法。

背景技術

近年來，刺激響應型高分子藥物偶聯物設計合成為實現腫瘤靶向治療目標帶來了新思路。其核心內容是將細胞毒性小分子藥物與含有特殊基團的高分子偶聯，從而形成暫時無活性的藥物偶聯物。在體內，以非活化形式被輸送至病灶部位，繼而利用病灶區域生理環境或外部特殊性刺激，使其活性母體藥物得以釋放。許多抗腫瘤小分子藥物的結構中含有可發生酰化反應的氨基，并且這些氨基往往影響著藥物的化學和生物學特性，一旦被其他基團修飾，將導致藥物的毒性下降，當修飾基團離去藥效得以復原。高分子與藥物偶聯的策略可以延長藥物在體內的循環時間，增加病灶組織細胞對藥物的有效攝取，提高藥物的生物利用度、降低藥物的毒副作用。

另一方面，為了使藥物快速在特定腫瘤組織中達到有效藥物治療濃度，采用受體靶向策略，即是利用受體分布的不均勻性達到增強藥物在靶細胞周圍富集一種有效措施。

由于環境光源的純凈性和時／空可控性，光動力治療在腫瘤的治療中已引起人們的極大關注。本發明采用香豆素基團作為光敏基團，香豆素具有光解效率高，雙光子吸收截面高，可以發生在近紅外雙光子光解反應且光解后不會產生毒副產物等優點，由于近紅外光具有很低的光毒性，較大的組織穿透深度。因此，具有很好的臨床應用前景

目前尚未見到此類光致斷裂受體靶向抗腫瘤藥物偶聯物的文獻報道。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種葉酸受體介導靶向、光(紫外光、近紅外雙光子)激活式抗腫瘤藥物偶聯物。

本發明的另一個目的是提供所述偶聯物的制備方法。

本發明的目的通過以下技術方案來予以實現：

提供一種葉酸受體介導、光響應抗腫瘤藥物偶聯物，其結構通式：

FA為葉酸；

PEG為分子量范圍500～5000Da的聚乙二醇；

D為含有氨基的抗腫瘤毒性藥物，包括阿霉素、紫杉醇、甲氨喋呤、吉西他濱或5-氟尿嘧啶。

作為一個典型案例，所述結構通式中的T為葉酸，D為阿霉素、紫杉醇、甲氨喋呤、吉西他濱或5-氟尿嘧啶。

所述一種葉酸受體介導、光響應抗腫瘤藥物偶聯物的制備步驟：

(1)將葉酸與雙端氨基聚乙二醇反應，得到葉酸功能化的單端氨基聚乙二醇；

(2)將葉酸功能化的單端氨基聚乙二醇與7-羧甲基-4-羥甲基香豆素反應得到主鏈末端含有羥甲基香豆素的聚乙二醇；

(3)將步驟(2)得到末端含有羥甲基香豆素的聚乙二醇與N，N’-丁二酰亞胺碳酸酯、氯甲酸乙酯、氯甲酸對硝基苯酯中的一種進行酯化反應，得到一種光敏基團羥基活化的聚乙二醇；

(4)將步驟(3)得到光敏基團的羥基活化的聚乙二醇與含氨基的抗腫瘤藥物發生親核取代反應，得到高分子藥物偶聯物。

在步驟(1)中，在無水二甲亞砜DMSO溶液中，采用DCC、NHS和三乙胺TEA組合催化劑，葉酸FA、雙端氨基聚乙二醇NH₂-PEG-NH₂、DCC、NHS和TEA的摩爾用量為1：1：1.5：1.5：5，室溫下攪拌反應5～15小時。

在步驟(2)中，在N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，加入FA-PEG-NH₂和7-羧甲基-4-羥甲基香豆素，在EDC、NHS組合催化下進行反應，它們的摩爾用量為1：1：1.5：1.5，室溫下攪拌反應5～15小時。

在步驟(3)中，將步驟(2)產物溶解在乙腈中，加入催化劑DMAP，再加入N，N’-二丁二酰亞胺碳酸酯、氯甲酸乙酯、4-硝基苯氧酰氯中的一種，在5～60℃下反應5～15小時。

在步驟(4)中，將步驟(3)得到的產物溶解在N，N’-二甲基甲酰胺(DMF)中，再加入溶解有阿霉素、紫杉醇、甲氨喋呤、吉西他濱或5-氟尿嘧啶的一種和Et₃N的DMF溶液，攪拌反應5～15小時。

本發明是基于含有光致斷裂基團的聚乙二醇為鏈接劑，對含有氨基的抗腫瘤藥物阿霉素等藥物進行酰化修飾，并與細胞特異性配體葉酸等相連，成功合成攜帶有光致斷裂結構和對腫瘤細胞上的葉酸受體具有高親和力的靶向光激活式高分子藥物偶聯物，能夠使抗腫瘤藥物主動靶向特定腫瘤組織細胞表面，并能夠在外界環境特定波長光刺激下釋放出原來抗腫瘤藥物毒殺腫瘤細胞，達到治療效果。