[發明專利]優質東北紅豆杉莖段愈傷組織一步誘導方法

有效

• 申請號: 201310566846.7
• 申請日: 2013-11-12
• 公開（公告）號: CN103598096A
• 公開（公告）日: 2014-02-26
• 發明（設計）人: 李春斌;岳玉蓮;王劍鋒;馬洪豐;王德萍;于鶴
• 申請（專利權）人: 大連民族學院;大連市金貴緣科技開發有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙) 21235
• 代理人: 胡景波

1.優質東北紅豆杉莖段愈傷組織一步誘導方法，即以當年生東北紅豆杉的莖段為外植體在誘導培養基上進行培養，最終得到疏松、淡綠色或白色的東北紅豆杉莖段愈傷組織；

所述的優質東北紅豆杉莖段愈傷組織一步誘導方法，具體包括以下步驟：

（1）外植體的消毒

取當年生東北紅豆杉的莖段，進行無菌化處理，獲得無菌的東北紅豆杉莖段外植體備用；

（2）愈傷組織誘導培養

將步驟（1）所得的消毒的紅豆杉外植體接種于誘導培養基上，控制溫度為18-22℃條件下暗培養，15天后得到誘導培養后的愈傷組織；

所述的誘導培養基的配方，按照每升計算具體為：

3792mg?KNO₃、15mg?MnSO₄·H₂O、225mg?CaCl₂·2H₂O、56mgNa₂EDTA·2H₂O、0.37mg?CoCl₂.6H₂O、0.39mg?CuSO₄·5H₂O、201mg(NH4)₂SO₄、3mgZnSO₄·7H₂O、3.0mg?NAA、41.8mg?FeSO₄·7H₂O、15mg?VB1、0.38mg?NaMoO₄.2H₂O、3.5mg?IAA、4.5mg?H₃BO₃、1.5mg煙酸、220mgNaH₂PO₄.H₂O、1.5mgKI、300mg?Vc、370mg?MgSO₄·7H₂O、1.5mg?VB₆、268.56mg肌醇、0.5-1mg2,4-D、2-3mg?IBA、0.3-0.5mg6-BA、20-30g蔗糖、7-9g瓊脂、2-3g活性炭和余量的水組成。

2.根據權利要求1所述的優質東北紅豆杉莖段愈傷組織一步誘導方法，其特征在于：步驟（1）中所述的無菌化處理具體是取當年生東北紅豆杉莖段，流水沖洗10小時，然后依次用70-75％的酒精消毒80-120s、0.1％氯化汞消毒10-15min，無菌水沖洗數次，使用無菌濾紙將水分吸干。