[發明專利]一種用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310562657.2
• 申請日: 2013-11-12
• 公開（公告）號: CN103760358A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 趙鐵銘;李小林;王枕亞;喜慶
• 申請（專利權）人: 趙鐵銘;喜慶
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑，其特征在于：所述用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑為應用膠乳增強免疫比濁法的檢測試劑，由試劑1和試劑2組成，其中試劑1為抗馮維勒布蘭德因子的抗體膠乳試劑，抗馮維勒布蘭德因子的抗體膠乳試劑為抗馮維勒布蘭德因子與膠乳顆粒結合而成的抗馮維勒布蘭德因子的抗體膠乳試劑；試劑2為應用液。

2.根據權利要求1所述的用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑，其特征在于：所述用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑還包括馮維勒布蘭德因子標準品或標準曲線；所述馮維勒布蘭德因子標準品為含有不同濃度的馮維勒布蘭德因子的反應緩沖液；標準曲線為馮維勒布蘭德因子在人體內含量的標準曲線。

3.根據權利要求1所述的用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑，其特征在于：所述抗馮維勒布蘭德因子的抗體膠乳試劑是通過將抗馮維勒布蘭德因子的抗體的氨基與膠乳顆粒的羧基經二步反應后形成共價鍵而得到；所述二步反應包括：第一步將膠乳顆粒先與結合劑反應，第二步再將膠乳顆粒與抗馮維勒布蘭德因子抗體反應。

4.根據權利要求3所述的用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑，其特征在于：所述抗馮維勒布蘭德因子的抗體膠乳試劑是通過將抗馮維勒布蘭德因子的抗體的氨基與膠乳顆粒的羧基經二步反應后形成共價鍵而得到；首先由將膠乳顆粒的羧基與結合劑在弱酸性下反應成膠乳顆粒-結合劑中間體，再將膠乳顆粒-結合劑中間體在弱堿性下與抗馮維勒布蘭德因子抗體氨基反應制得抗馮維勒布蘭德因子抗體膠乳試劑。

5.根據權利要求1所述的用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑，其特征在于：所述膠乳顆粒為苯乙烯膠乳顆粒。

6.根據權利要求1所述的用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑，其特征在于：所述膠乳顆粒的粒徑為200～1000nm。

7.根據權利要求8所述的用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑，其特征在于：所述結合劑選自濃度為0.1～5％的碳二亞胺。

8.一種制備權利要求1～7任一所述的用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟a)制備抗馮維勒布蘭德因子抗體膠乳：將抗馮維勒布蘭德因子抗體與膠

乳顆粒經二步反應后交聯成抗馮維勒布蘭德因子抗體膠乳；

步驟b)制備應用液或稀釋液。

9.根據權利要求8所述的制備用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑的方法，其特征在于，步驟a)的具體操作如下：將膠乳顆粒用純凈水清洗后懸浮于活化緩沖液中；加入結合劑在溫度小于50℃下攪拌反應，從而活化膠乳顆粒；再加入抗馮維勒布蘭德因子抗體在結合緩沖液中在溫度小于50度下攪拌反應；再懸浮于含有封閉劑的滅活液中反應，經清洗后懸浮于保存緩沖液中，得抗馮維勒布蘭德因子抗體膠乳懸液，置于4℃環境放置。

10.一種制備權利要求1～7任一所述的用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑的應用，其特征在于：將權利要求1～7任一所述的用于檢測馮維勒布蘭德因子的試劑作為檢測試劑用于制備馮維勒布蘭德因子檢測產品。