[發明專利]檢測人老齡化的多肽標志物

有效

• 申請號: 201310560354.7
• 申請日: 2013-11-12
• 公開（公告）號: CN103694342A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 鄧玉林;張玫
• 申請（專利權）人: 北京理工大學
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;G01N30/06;G01N30/02
• 代理公司: 北京永瑞專利代理事務所(普通合伙) 11450
• 代理人: 張慶敏

1.檢測人老齡化的多肽標志物，其特征在于：所述多肽標志物的肽段序列為LDELRDEGK和/或VFDEFKPLVEEPQNLIK。

2.根據權利要求1所述的多肽標志物，其特征在于：所述多肽標記物來源于人血清白蛋白。

3.權利要求1或2所述的多肽標志物的篩選方法，其特征在于：采用不依賴常規標物的非標記HPLC-MS/MS定量醛修飾高豐度蛋白肽段的方法以篩選出合適的肽段用于HPLC-MS檢測以預警老齡化。

4.根據權利要求3所述的篩選方法，其特征在于：首先基于人血清白蛋白HSA建立體外模擬老齡化模型，采用¹⁸O標記方法考察小分子醛類物質對人血清白蛋白的修飾情況；將酶切后的空白對照組樣品進行¹⁸O標記，與采用¹⁶O平行處理的反應組樣品1:1(v/v)混合，進行HPLC-MS檢測；分析不同孵育時間、不同濃度甲醛/丙酮醛溶液對標準HSA的修飾程度；通過對HSA肽段的定量分析，找到一組對醛不敏感的肽段，在其中選擇最不易被醛修飾的肽段AAFTECCQAADKAACLLPK作為內標肽段，將易被醛修飾的肽段與內標肽段峰面積之比用以衡量醛敏感肽的修飾程度；從而篩選出與甲醛/丙酮醛共育具有濃度、時間相關性的醛敏感肽段；接下來，將這些肽段用正常人血漿樣品，在與標準蛋白相同的體外孵育條件下進行驗證；繼而在不同年齡段人群的臨床血漿樣本中驗證醛敏感肽段，經檢測最終獲得2條肽段VFDEFKPLVEEPQNLIK和LDELRDEGK為生物標志物用于預警老齡化。