[發(fā)明專利]一種海豚鏈球菌DNA疫苗及其應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310557674.7 | 申請(qǐng)日: | 2013-11-11 |
| 公開(公告)號(hào): | CN103550765A | 公開(公告)日: | 2014-02-05 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 孫黎;孫云;孫鉑光 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 中國(guó)科學(xué)院海洋研究所 |
| 主分類號(hào): | A61K39/09 | 分類號(hào): | A61K39/09;A61P31/04;C12N15/85;C12N15/66;C12R1/46 |
| 代理公司: | 沈陽(yáng)科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002 | 代理人: | 周秀梅;李穎 |
| 地址: | 266071*** | 國(guó)省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 海豚 鏈球菌 dna 疫苗 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種海豚鏈球菌DNA疫苗,其特征在于:疫苗為pCNSiE。
2.按權(quán)利要求1所述的海豚鏈球菌DNA疫苗,其特征在于:
以海豚鏈球菌G26為模板經(jīng)引物F1/R1進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物與載體pCN3質(zhì)粒連接轉(zhuǎn)化后質(zhì)粒pCNSiE,即為海豚鏈球菌DNA疫苗;
所述引物序列為:
F1:5’-CCCGGGATGATTTTTGGAAAAAGTAGTAATGGA-3;
R1:5’-CCCGGGCCTTCTTACCTTTGACTGAT-3’。
3.按權(quán)利要求1或2所述的海豚鏈球菌DNA疫苗,其特征在于:所述質(zhì)粒pCNSiE在PBS中稀釋至終濃度為150μg/ml,作為疫苗制備液。
4.按權(quán)利要求1或2所述的海豚鏈球菌DNA疫苗,其特征在于:所述疫苗為注射劑。
5.一種權(quán)利要求1所述的海豚鏈球菌DNA疫苗的制備方法,其特征在于:
以海豚鏈球菌G26為模板,采用F1/R1為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR產(chǎn)物純化后與用SmaI酶切的質(zhì)粒pCN3連接,連接液轉(zhuǎn)化到大腸桿菌DH5α后在含有氨芐青霉素的LB培養(yǎng)基上培養(yǎng)18-24小時(shí),接轉(zhuǎn)化后質(zhì)粒為pCNSiE,即為海豚鏈球菌DNA疫苗質(zhì)粒。
6.一種權(quán)利要求1所述的海豚鏈球菌DNA疫苗的應(yīng)用,其特征在于:所述質(zhì)粒pCNSiE用于制備海豚鏈球菌的免疫疫苗中的應(yīng)用。
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