[發(fā)明專利]一種疫苗組合物及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310556460.8
• 申請日: 2013-11-08
• 公開（公告）號: CN104248758A
• 公開（公告）日: 2014-12-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張?jiān)S科;孫進(jìn)忠;田克恭
• 申請（專利權(quán)）人: 普萊柯生物工程股份有限公司
• 主分類號: A61K39/295
• 分類號: A61K39/295;A61K39/39;A61P31/04;A61P31/22
• 代理公司: 北京華夏正合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種疫苗組合物，以及該疫苗組合物的制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

豬偽狂犬病(Pseudorabies，PR)是多種動物共患的傳染病，引起家畜和野生動物急性致死性的傳染病，以發(fā)熱、奇癢和腦脊髓炎為主要癥狀，豬是其自然易感宿主，主要引起妊娠母豬流產(chǎn)、死胎和木乃伊胎，仔豬感染主要是神經(jīng)癥狀，成年豬則以隱性感染為主。

豬偽狂犬病是一種由偽狂犬病毒引起的高死亡率的急性傳染病。豬偽狂犬病病毒(PRV)屬于皰疹病毒科(Herpesvirdae)、α2皰疹病毒亞科(Alpherpesvirinae)。目前僅發(fā)現(xiàn)一種血清型的PRV。該病最早發(fā)現(xiàn)于美國，后由匈牙利學(xué)者Aujeszky首次分離出該病毒，因而又稱奧耶斯基病(Aujeszkys?Disease)。目前該病分布于全世界50多個國家和地區(qū)，對養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅，已引起世界各國的高度關(guān)注。該病在我國的發(fā)生已較嚴(yán)重，是現(xiàn)在危害我國規(guī)模養(yǎng)豬業(yè)最嚴(yán)重的疫病之一。豬偽狂犬病的發(fā)生往往繼發(fā)或混合感染一種或幾種某些病毒性，細(xì)菌性，寄生蟲性疾病。這種混合感染的診斷與防治都十分困難。豬偽狂犬病病毒可侵害各種日齡階段的豬，病毒可在康復(fù)豬的嗅球、三叉神經(jīng)節(jié)和其他神經(jīng)組織中潛伏，在豬受到體內(nèi)外因素的刺激時，體內(nèi)的病毒活化后通過排毒和傳播，引起妊娠母豬流產(chǎn)、死胎或木乃伊胎，即使具有較高的母源抗體水平的哺乳仔豬在受到野毒感染時，也會出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，如麻痹，最后因衰竭而死亡，而不易致死的，也會表現(xiàn)出體溫升高、食欲下降等臨床癥狀，且耐過病后常出現(xiàn)生長阻滯。豬偽狂犬病野毒更可能誘導(dǎo)或加劇呼吸道癥狀，也可能與斷奶后的腹瀉有關(guān)，并且還可降低豬的機(jī)體對其他疫苗如豬瘟疫苗的體液免疫應(yīng)答能力，抑制抗體水平的升高。豬偽狂犬病病毒的持續(xù)性感染和潛在的免疫抑制，對于豬的疾病防治工作帶來了很大的困難。目前，進(jìn)行疫苗接種是預(yù)防、控制甚至消滅偽狂犬病最主要的措施之一。國內(nèi)外已研制出豬偽狂犬病的常規(guī)弱毒疫苗、滅活疫苗、基因缺失弱毒疫苗和基因缺失滅活疫苗，而病毒載體重組疫苗和基因疫苗尚處于實(shí)驗(yàn)室研究階段。基因缺失疫苗已在生產(chǎn)中發(fā)揮著重要的作用，尤其在美國和歐洲一些發(fā)達(dá)國家的PRV根除計(jì)劃中功不可沒。

當(dāng)前偽狂犬疫苗的種類有：一：滅活苗。優(yōu)點(diǎn)是安全，不會散毒；缺點(diǎn)是免疫效果不是很好。二：自然缺失弱毒活疫苗，弱毒活疫苗是將分離到的野毒株經(jīng)非豬源細(xì)胞反復(fù)傳代，或適應(yīng)雞胚，或加入致突變劑在高于一般的培養(yǎng)溫度條件下，在細(xì)胞上反復(fù)傳代而獲得的疫苗。目前使用較多的是Bartha、Buk毒株。優(yōu)點(diǎn)是弱毒苗具有良好的免疫原性，而且價(jià)格低廉，至今仍在偽狂犬病的防控中起著重要作用。缺點(diǎn)是未經(jīng)充分致弱的弱毒苗的毒力可能會返強(qiáng)而導(dǎo)致疾病的流行；弱毒疫苗可建立潛伏感染，并有可能散毒。三，基因工程疫苗：包括基因工程缺失弱毒活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗、重組病毒疫苗。（一）1.基因工程缺失弱毒活疫苗優(yōu)點(diǎn)：都缺失了目的基因的幾百甚至幾千個堿基，缺失區(qū)域明確，所以它們返祖的可能性極小。2.基因工程缺失弱毒活疫苗缺點(diǎn)：基因缺失疫苗能否引起潛伏感染或被激活為感染性病毒令人擔(dān)憂。（二）亞單位疫苗：是利用PRV保護(hù)性抗原基因，在原核或真核系統(tǒng)中表達(dá)所獲得的產(chǎn)物制成的疫苗。1.亞單位疫苗的優(yōu)點(diǎn):不含有核酸物質(zhì)因此比較安全，接種后不會產(chǎn)生持續(xù)感染或潛伏感染。產(chǎn)生的免疫應(yīng)答可以與野毒感染相區(qū)分，有利于疫病的控制和消滅。2.亞單位疫苗的缺點(diǎn):生產(chǎn)成本高，免疫原性不及弱毒疫苗及滅活疫苗，應(yīng)用受到限制。（三）核酸疫苗：核酸疫苗是指將編碼外源蛋白質(zhì)的核酸表達(dá)載體注射入機(jī)體，以激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生針對外源蛋白質(zhì)特異性的免疫應(yīng)答。1.核酸疫苗的優(yōu)點(diǎn):能克服偽狂犬病病毒的潛伏感染，安全性高，免疫期長，而且能激發(fā)細(xì)胞免疫。2.核酸疫苗的缺點(diǎn):雖然核酸疫苗的免疫能產(chǎn)生較高的抗體水平，但對強(qiáng)毒攻擊的保護(hù)力不理想。（四）重組疫苗。重組疫苗的優(yōu)點(diǎn)：載體病毒較穩(wěn)定，免疫原性持久，刪除毒力基因的活載體疫苗能誘發(fā)體液免疫和細(xì)胞免疫，避免了滅活苗免疫的缺點(diǎn)，接種方便安全。重組疫苗的缺點(diǎn)：有些載體對人或動物具有潛在致病性，對人或動物具有潛在的威脅。另外，重復(fù)使用會使動物對載體病毒產(chǎn)生免疫反應(yīng)。