[發明專利]一種中藥組合物中苦參堿的含量測定方法

在審

• 申請號: 201310555315.8
• 申請日: 2013-11-11
• 公開（公告）號: CN104634884A
• 公開（公告）日: 2015-05-20
• 發明（設計）人: 李曉燕;柏艷柳;劉麗杰;周夢夏;安軍永;王超;秦攏;王猛
• 申請（專利權）人: 河北以嶺醫藥研究院有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種中藥組合物中苦參堿的含量測定方法，該中藥組合物由下列重量份數的原料藥組成：人參42-160、黃精50-200、蒼術30-100、苦參20-60、麥冬50-200、地黃50-120、何首烏35-100、山茱萸50-200、茯苓35-100、佩蘭30-60、黃連20-60、知母30-100、淫羊藿30-60、丹參35-120、葛根50-200、荔枝核75-150、地骨皮30-100組成；所述中藥組合物的制劑劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑，其特征在于測定方法由以下步驟組成：

a、供試品溶液的制備：取制劑，加入甲醇，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱重，用甲醇補足重量，濾過，量取續濾液，蒸干，殘渣加水潤濕后，再用甲醇轉移至中性氧化鋁柱上，用甲醇洗脫，搖勻，過濾，即得；

b、對照品溶液的制備：取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含苦參堿30μg的溶液，即得；

c、測定：分別精密吸取供試品溶液、對照品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀中，測定，計算，測得苦參堿含量。

2.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于測定方法由以下步驟組成：

a、取相當于該中藥組合物生藥量0.8-33.6g的制劑，加入50-80%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理10-40分鐘，放冷，再稱重，用50-80%甲醇補足重量，濾過，量取續濾液25ml，蒸干，殘渣加水潤濕后，再用甲醇轉移至中性氧化鋁柱上，用甲醇洗脫，搖勻，過濾，即得；

b、對照品溶液的制備：取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含苦參堿30μg的溶液，即得；

c、測定：分別精密吸取供試品溶液、對照品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀中，測定，計算，測得苦參堿含量。

3.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于：所述步驟c中高效液相色譜柱填充劑為氨基鍵合硅膠；檢測波長為210nm；流動相為體積比為84:7:9的乙腈-無水乙醇-2%磷酸溶液，流速為1.0ml/min。

4.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于顆粒劑中苦參堿的含量測定由以下步驟組成：

a、供試品溶液的制備：取該中藥組合物顆粒，研細，稱取0.3-11.8g，加入50-80%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，超聲溫度30℃，放冷，再稱重，用50-80%甲醇補足重量，濾過，量取續濾液25ml，蒸干，殘渣加水潤濕后，再用甲醇轉移至中性氧化鋁柱上，用甲醇洗脫，搖勻，過濾，即得；

b、對照品溶液的制備：取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含苦參堿30μg的溶液，即得；

c、測定：分別精密吸取供試品溶液、對照品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀中，高效液相色譜柱填充劑為氨基鍵合硅膠；檢測波長為210nm；流動相為體積比為84:7:9的乙腈-無水乙醇-2%磷酸溶液，流速為1.0ml/min,測定，計算，測得苦參堿含量。

5.根據權利要求1-4任一項所述的測定方法，其特征在于該中藥組合物的活性成分制備過程如下：

a、按照原料藥重量比例稱取中藥材，凈選、碎斷；

b、佩蘭、蒼術加5-9倍量水提取揮發油，提取3-6小時，揮發油另器收集，水溶液過濾后備用；

c、山茱萸用5-9倍量50-90%乙醇做溶劑，浸漬12-48小時后，進行滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，并濃縮成60℃測定相對密度為1.30-1.35的稠膏，烘干，備用；

d、人參、麥冬、淫羊藿、知母、葛根，加6-10倍量50-90%乙醇，回流提取1-3次，每次1-3小時，提取液過濾，回收乙醇，濃縮成稠膏，烘干，備用；

e、黃精、苦參、地黃、何首烏、茯苓、黃連、丹參、荔枝核、地骨皮，加7-11倍量水，煎煮1-2次，每次1-3小時，提取液過濾，與步驟b中佩蘭、蒼術提油后的水溶液合并，濃縮成清膏，加乙醇調節醇濃度為50-80%，冷藏放置，過濾，濾液回收乙醇，濃縮至稠膏，烘干，備用；

步驟c所得山茱萸干膏、步驟d所得醇提干膏、步驟e?所得水提醇沉干膏與步驟b所得揮發油共同構成該中藥組合物的活性成分。