[發明專利]一種帶型蜈蚣藻無性繁殖育苗的方法

無效

• 申請號: 201310554332.X
• 申請日: 2013-11-11
• 公開（公告）號: CN103651116A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 張明
• 申請（專利權）人: 青島佰眾化工技術有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京一格知識產權代理事務所(普通合伙) 11316
• 代理人: 滑春生;趙永偉

技術領域

本發明涉及一種帶型蜈蚣藻無性繁殖育苗的方法，屬于植物組織培養技術領域。

背景技術

帶型蜈蚣藻（Grateloupia?turuturu），隸屬于紅藻門（Rhodophyta）、真紅藻綱（Florideae）、杉藻目（Gigartinales）、海膜科（Halymeniaceae?Bory）、蜈蚣藻屬（Grateloupia?C.Agardh）；帶型蜈蚣藻含有豐富的卡拉膠，在食品工業作為增稠劑、穩定劑；在紡織工業作為上漿材料；由于卡拉膠寡糖在免疫領域也具有發展潛力，所以也是具有食療價值的經濟海藻；因此蜈蚣藻的原料需求量越來越大。但蜈蚣藻的來源非常有限，目前主要采集野生的資源，自然分布的空間少，數量不穩定，質量難保證，人工養殖的瓶頸是種苗來源缺乏穩定而充足的供應。?????

帶型蜈蚣藻的有性繁殖育種周期比較長，不適用于大規模育種繁育。目前為止，絲狀體用于蜈蚣藻種苗培育的優勢比較明顯，絲狀體既可以作為種質保存的材料，又可以作為生產原料投入大規模的生產，如張澤宇（大連水產學院學報、2007年，第22卷第3期、164-169）成功的將蜈蚣藻切段誘導形成絲狀體，絲狀體可以形成幼苗并可在海上成活；但是，絲狀體育苗具有產苗率低、難以長期保存的缺點，如何克服這些缺點仍是今后需要研究的課題。Iima（Cultivationof?Grateloupia?acuminata?(Halymeniaceae,?Rhodophyta)?by?regeneration?from?cut?fragments?of?basal?crusts?and?upright?thalli.?J.?Appl.?Phycol.?7:?583–588）曾經進行過頂狀蜈蚣藻盤狀體再生的研究，將盤狀體接種到玻璃、瓷器及尼龍繩等基質上之后，于海上放養3個月，盤狀體便可長成20?cm左右的成熟藻體，大大縮短了育苗所需的時間；但是這種方法的盤狀體誘導率很低（不足50%），很多盤狀體形成了絲狀體，雖然絲狀體還可以進一步形成盤狀體，但無形中增加了育種時間和精力，難以得到大規模的推廣。

發明內容

針對現有技術存在的缺陷，本發明所要解決的技術問題是提供一種帶型蜈蚣藻無性繁殖育苗的方法，作為外植體的盤狀體在特定培養基中定向形成盤狀體而不是絲狀體，既可以增加盤狀體的誘導率，又可以減少育種時間。

為了解決上述技術問題，本發明的技術方案如下：

一種帶型蜈蚣藻無性繁殖育苗的方法：包括如下步驟：

（1）種源盤狀體誘導：以蜈蚣藻果孢子體或四分孢子體作為種藻，除去藻體表面的淤泥、雜藻、壞死組織及其他附著物；用3%次氯酸鈉消毒藻體3～5min，然后用無菌過濾海水清洗干凈，無菌條件下將種藻切成1～2m²的藻塊，將藻塊在黑暗條件下陰干15～30min；陰干的藻塊放于裝有附著基的培養容器中，加入無菌過濾海水，于18～20℃全黑暗條件靜置培養；靜置培養24h后，將附著基取出放入裝有VSE培養液的培養容器中，于溫度18～20℃、光強1000～1500Lx、光照12h的條件下誘導盤狀體，每2天換一次培養液至盤狀體肉眼可見；

（2）種源盤狀體培育：將步驟1中附有盤狀體的附著基轉移至新的培養容器中，向培養容器中倒入VSE培養液至淹沒附著基，于溫度22～25℃、光強2000～2500Lx、光照12h的條件下培育盤狀體至直徑為0.2-0.5mm；每2天換一次培養基；

（3）再生盤狀體誘導：將步驟2中獲得的盤狀體從附著基上剝離，無菌過濾海水沖洗干凈后，用組織搗碎機切碎，將切碎的盤狀體灑在鋪有附著基的育苗容器中，添加改良VSE培養液后，于溫度18～20℃、光強1000～1500Lx、光照12h的條件下誘導再生盤狀體形成，每2天換一次培養液至盤狀體肉眼可見；

（4）直立枝培育：將步驟3中獲得的盤狀體一部分留作種質資源保存，一部分轉移到過濾滅菌的海水中在溫度22～24℃、光強2500～3000Lx、光照12h的條件下誘導直立枝發生，直立枝長度為5～8cm后轉移到海上進行人工養殖。

進一步的，步驟3中所述的改良VSE培養液的配方為，1L?VSE培養液中添加0.5～2mg的IAA、0.1～0.5mg的ZT和10～15g的蔗糖。

進一步的，步驟4中所述的盤狀體種質保存方法為，將附有盤狀體的附著基置于裝有改良儲存培養液的器皿中，置于10℃、全黑暗條件下靜置儲存。