[發明專利]一種禽流感H9亞型滅活疫苗及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310553960.6
• 申請日: 2013-11-08
• 公開（公告）號: CN103736088A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發明（設計）人: 陳瑞愛;林綺萍;陳春麗;黃文科;徐家華;嚴潔珍
• 申請（專利權）人: 廣東大華農動物保健品股份有限公司;肇慶大華農生物藥品有限公司
• 主分類號: A61K39/145
• 分類號: A61K39/145;A61P31/16;C12R1/93
• 代理公司: 廣州市越秀區哲力專利商標事務所(普通合伙) 44288
• 代理人: 湯喜友

1.一種禽流感H9亞型滅活疫苗，其特征在于：由2株H9亞型禽流感病毒經滅活后和油佐劑混合組成，2株H9亞型禽流感病毒分別為HZ株和FJ株，其保藏登記號分別為CGMCC：8355和CGMCC：8354，HZ株的HA基因序列如SEQ?ID?NO:1所示，FJ株的HA基因序列如SEQ?ID?NO:2所示。

2.一種權利要求1所述的禽流感H9亞型滅活疫苗的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

1）制備H9亞型禽流感病毒HZ株毒液：將H9亞型禽流感病毒HZ株用生理鹽水作10^-4稀釋，接種9~11日齡SPF雞胚，無菌收獲24~96?小時內死亡及96?小時后仍存活的HA≥8log2的雞胚尿囊液作為H9亞型禽流感病毒HZ株毒液；

2）制備H9亞型禽流感病毒FJ株毒液：將H9亞型禽流感病毒FJ株用生理鹽水作10^-4稀釋，接種9~11日齡SPF雞胚，無菌收獲24~96?小時內死亡及96?小時后仍存活的HA≥8?log2的雞胚尿囊液作為H9亞型禽流感病毒FJ株毒液；

3）滅活H9亞型禽流感病毒HZ株毒液：在HZ株毒液中加入終濃度為0.2%甲醛溶液，37℃搖床滅活24?小時；

4）滅活H9亞型禽流感病毒FJ株毒液：在FJ株毒液中加入終濃度為0.1%甲醛溶液，37℃搖床滅活24?小時；

5）制備油相溶液：將白油和司本-80按照體積比為18~20:1混合均勻，加熱溶解后經121℃滅菌20?分鐘；

6）制備水相溶液：將滅活的HZ株毒液和滅活的FJ株毒液按照體積比為6：4混合均勻，加入占混合毒液體積比0.75%的高壓滅菌的吐溫-80，用磁力攪拌器混勻攪拌至吐溫完全溶解；?

7）乳化：將油相溶液和水相溶液按照體積比為1~2:1混合均勻，在乳化攪拌機中攪拌，即制成所述禽流感H9亞型滅活疫苗。

3.根據權利要求2所述的一種禽流感H9亞型滅活疫苗的制備方法，其特征在于：步驟5）中的白油和司本-80按照體積比為18.5:1混合。

4.根據權利要求2所述的一種禽流感H9亞型滅活疫苗的制備方法，其特征在于：步驟7）中的油相溶液和水相溶液按照體積比為1.5:1混合。

5.一種禽流感H9亞型滅活疫苗在預防雞禽流感疾病中的應用。