[發明專利]幾個具有強殺蟲活性的吲哚咔唑生物堿及產生菌株

在審

• 申請號: 201310547718.8
• 申請日: 2013-10-31
• 公開（公告）號: CN104593281A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: 王林
• 申請（專利權）人: 王林
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/18;C12P7/66;A01N43/90;A01N37/42;A01P7/04;C12R1/465
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

1.幾個具有強殺蟲活性的吲哚咔唑生物堿及產生菌株，所述的吲哚咔唑生物堿化合物產生菌株CQT14-24，為海洋生境硝孢鏈霉菌Streptomyces?nitrosporus，CQT14-24菌株經人工培養，得到發酵物再經常規化學方法提取，可獲得4個吲哚咔唑生物堿和1個蒽醌類化合物，5個化合物均對多種植物害蟲具有強殺傷作用，其特征包括如下步驟：?

1)以其保藏編號為：CGMCC?No.4607的菌株CQT14-24，置于下述固體培養基培養5天，再轉入相同配方的發酵液中發酵培養，培養基配方為：可溶性淀粉15-20g，黃豆浸汁150-200ml，海泥浸汁100-150ml，KNO₃1.1-1.5g，K₂HPO₄0.4-0.8g，MgSO₄0.5-0.8g，NaCl，12-20g，KCl0.04-0.09g，MgCl₂0.23-0.50g，FeSO4·7H₂O0.01-0.03g，復合維生素1mL/L，水650-750ml，pH7-7.5，不加瓊脂為培養液，加瓊脂16-19g為固體培養基，25℃-26℃轉速150rpm，振蕩培養11天獲得發酵物，發酵物分為菌體和菌液；?

2)菌液減壓濃縮后用乙酸乙酯萃取3次，旋蒸后得浸膏；菌體乙酸乙酯超聲提取，浸膏薄層分析后與菌液浸膏合并，減壓柱層析，石油醚∶丙酮(20∶1)，二氯甲烷∶甲醇(1∶1)，甲醇分別洗脫，將二氯甲烷∶甲醇上ODS柱分離純化，分別用甲醇∶水(2∶3)以及100％甲醇洗脫，用凝膠柱層析、HPLC色譜常規分離技術得到4個吲哚咔唑生物堿和1個蒽醌化合物。?

2.根據權利要求1所述的具有強殺蟲活性吲哚咔唑生物堿和蒽醌化合物的制備方法，其特征在于：所述的5個化合物的結構為Des(hydroxyimino)-TAN1030A(1)、holyrine?A(2)、RK-1409(3)、Streptocarbazoles?B(4)、K1115A(5)，其中化合物1-4為吲哚咔唑生物堿，5為蒽醌類化合物。?

3.根據權利要求1所述的幾個具有強殺蟲活性的吲哚咔唑生物堿及產生菌株，其特征在于：所述的4個吲哚咔唑生物堿和1個蒽醌類化合物用常規方法測試活性，對農業常見和危害嚴重的菜青蟲(Pieris?rapae)、甘藍蚜(Brevicoryne?brassicae)、美國白蛾(Hyphantria?cunea)、小菜蛾(Plutella?xyllostella)、粘蟲(Mythimna?separata)，棉鈴蟲(Helicoverpa?armigera)的生長、存活與化蛹都具有很強的殺蟲活性，其校正死亡率可達81.9％-100％，蟲體嚴重縮小，生長的抑制率均為100％，化蛹率降低70.4％-86.7％。?