[發明專利]一種氣味沙雷氏菌及其生產組胺的方法有效
| 申請號: | 201310543215.3 | 申請日: | 2013-11-06 |
| 公開(公告)號: | CN103555631A | 公開(公告)日: | 2014-02-05 |
| 發明(設計)人: | 盧士玲;李蕊婷;李開雄;許程劍;李寶坤 | 申請(專利權)人: | 石河子大學 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12P17/10;C12R1/425 |
| 代理公司: | 江蘇圣典律師事務所 32237 | 代理人: | 孫忠浩 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 氣味 沙雷氏菌 及其 生產 組胺 方法 | ||
技術領域
????本發明涉及微生物領域,特別是一種氣味沙雷氏菌及其生產組胺的方法。?
背景技術
組胺是一種活性胺化合物,化學式是C5H9N3,分子量是111.15。中文同名詞為1H-咪唑-4-乙胺、2-咪唑基乙胺、組織胺、Β-氨基乙基咪唑、Β-氨乙基甘噁啉、組氨、麥角胺,是合成藥物的重要中間體,也可以作為生化試劑,目前,我國組胺需求量大,多數從國外進口,價格昂貴。?
傳統的組胺生產是采用人工合成,這種方法生產的組胺純度低,生產效率低,并且難以提純。通過微生物代謝產生組胺,獲得高濃度組胺液,然后提取組胺,確實能降低組胺的生產成本和能源消耗,也成為研究的主要方向。?
????氣味沙雷氏菌(Serratia?odorifera)是沙雷氏菌屬?(SerratiaBizio)中的一種。菌體直桿狀,直徑0.5~0.8μm,長0.9~2.0?μm,端圓。符合腸桿菌科的一般描述。通常周生鞭毛運動。兼性厭氧。菌落大多數不透明,有些虹彩;白色、粉紅或紅色。在自然界分布很廣,是水和土壤中的常居菌群,是引起醫院內感染的重要條件致病菌。可引起多種感染,如尿路感染、創傷感染、肺炎、膿胸、肺膿腫、腹膜炎、心內膜炎及敗血癥等。?
?????氣味沙雷氏菌與少數肺部感染及尿路感染有關。但已被證實的氣味沙雷氏菌中,未見高產組胺報道。?
發明內容
?????針對目前人工合成組胺純度低的問題,提供一種氣味沙雷氏菌并通過該菌代謝產生高濃度組胺液。?
?????本發明是這樣實現的:一種氣味沙雷氏菌(Serratia?odorifera),其特征在于:保藏號為CGMCC?No.?7781。?
?????一種利用所述氣味沙雷氏菌生產組胺的方法,其特征在于:?
1)將菌落接種于裝有A培養基的試管中活化,接種量為105cfu/ml,37℃靜置培養24小時,重復上述步驟五次;
2)將步驟1)的菌液接種到B培養基中,接種量為106cfu/ml,37℃靜止培養4天;
3)將步驟2)培養的菌液放入離心機中,?10000轉離心10分鐘,取上清液,即為組胺液;
所述的A培養基為:改良MSA液體培養基中添加質量比為0.1%組氨酸;
所述的B培養基為:改良MSA液體培養基中添加質量比為0.005%的磷酸吡哆醛和質量比為0.1%的組氨酸;
所述改良MSA液體培養基為:蛋白胨10g,牛肉膏1g,D-甘露醇10g,NaCl?40g,酚紅0.025g,蒸餾水1000mL,pH值7.2~7.6,115℃滅菌15分鐘。
?本發明的優點在于,由于保藏號為CGMCC?No.?7781的氣味沙雷氏菌(Serratia?odoridera)產組胺能力強,所得組胺液濃度高,可以極大降低生產成本和節約能源。?
附圖說明
圖1為氣味沙雷氏菌電子顯微鏡照片。?
圖2為高效液相色譜檢測組胺標準曲線。?
圖3檢測氣味沙雷氏菌產組胺高效液相色譜圖。?
具體實施方式
實施例1?
實施例1???氣味沙雷氏菌Serratia?odorifera.的篩選和保藏
培養基配方:
改良MSA液體培養基:蛋白胨10g,牛肉膏1g,D-甘露醇10g,NaCl?40g,酚紅0.025g,蒸餾水1000mL,pH值7.2~7.6,115℃滅菌15分鐘。
下層培養基:胰蛋白胨10g,牛肉膏1g,D-甘露醇10g,NaCl?40g,磷酸吡哆醛0.05g,組氨酸5g,瓊脂18g,1000ml蒸餾水,pH值5.5,115℃高壓滅菌15分鐘。?
上層培養基:溴甲酚紫0.06g,瓊脂15g,1000ml蒸餾水,?pH值5.5,?121℃滅菌10分鐘。?
改良MSA固體培養基:在改良MSA液體培養基中加入質量比為1.8%的瓊脂。?
篩選方法:?
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