[發(fā)明專利]提高蟲草素含量的蛹蟲草培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310541025.8
• 申請日: 2013-11-05
• 公開（公告）號: CN103609329A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陶志康;丁志紅
• 申請（專利權(quán)）人: 昆山市康樂蟲草專業(yè)合作社;陶志康
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04;C05G1/00
• 代理公司: 上海思微知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31237
• 代理人: 陸花

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種提高蟲草素含量的蛹蟲草培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

蛹蟲草，又名北冬蟲夏草，屬于子囊亞門、核菌綱、球殼菌目、麥角菌科、蟲草屬，是我國名貴中藥材之一。蟲草素是一些蟲草真菌的特征性成分，也是蟲草真菌中最重要的活性成分之一。

蟲草素有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗疲勞、調(diào)節(jié)心肺等功能。蟲草素作為一種新型的廣譜抗菌素，以其特有的抗菌抗病毒活性，它能抑制病毒的RNA合成；對枯草桿菌和鳥結(jié)核桿菌均有抑制作用；對HIV-I型病毒也有殺傷作用；尤其對多種實體惡性腫瘤有很強的抑制作用，能增強免疫功能、防治心腦血管疾病等等。蟲草素顯示極好的藥學(xué)應(yīng)用前景，目前蟲草素的研究正成為藥物化學(xué)中的一個極其活躍的領(lǐng)域。

蟲草素在冬蟲夏草中的含量極微，提高蟲草屬真菌的蟲草素含量的方法有兩類，一類是通過菌株的誘變育種等方式，提高原有菌種的蟲草素產(chǎn)量水平；另一種方法是通過培養(yǎng)條件優(yōu)化和培養(yǎng)過程中添加誘導(dǎo)物的方式提高蟲草素的含量。

發(fā)明內(nèi)容

為了提高蛹蟲草中蟲草素的含量，本發(fā)明提供一種提高蟲草素含量的蛹蟲草子實體培養(yǎng)方法。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種提高蟲草素含量的蛹蟲草培養(yǎng)方法，包括菌絲體培養(yǎng)和子實體培養(yǎng)，所述菌絲體培養(yǎng)包括以下步驟：在固體培養(yǎng)基中進行菌種的活化、在液體培養(yǎng)基中進行液體菌種的培養(yǎng)和在發(fā)酵罐培養(yǎng)基中進行發(fā)酵罐培養(yǎng)，所述固體培養(yǎng)基、所述液體培養(yǎng)基和所述發(fā)酵罐培養(yǎng)基均含有重量百分比2%～9%的醋酸鋅。

蟲草菌絲體對鋅離子有極強的富集能力，在鋅離子脅迫下，菌絲體內(nèi)蟲草素含量會增加；子實體蟲草素含量可達(dá)1.5～2.1mg/g，是未加高濃度鋅離子脅迫的所獲得的子實體的蟲草素含量的2～3倍。

此外，本發(fā)明采用醋酸鋅，醋酸鋅水溶液的pH值適于菌種的培養(yǎng)，醋酸根離子生物相容性好，易吸收降解，不會刺激人體腸胃，不會對人體產(chǎn)生副作用。

作為優(yōu)選，所述固體培養(yǎng)基包括以下重量配比的組分：葡萄糖15～25份、蛋白胨5～10份、瓊脂14～19份、磷酸二氫鉀0.02～0.04份、硫酸鎂0.02～0.03份、醋酸鋅0.03～0.06份、維生素B₁0.01～0.03份和土豆180～220份。

作為優(yōu)選，所述液體培養(yǎng)基包括以下重量配比的組分：葡萄糖16～24份、蛋白胨6～8份、磷酸二氫鉀0.03～0.05份、硫酸鎂0.03～0.04份、醋酸鋅0.04～0.09份、維生素B₁0.01～0.03份和水930～950份。

作為優(yōu)選，所述發(fā)酵罐培養(yǎng)基包括以下重量配比的組分：蔗糖8～20份、蛋白胨1.6～4份、酵母提取物1.6～4份和醋酸鋅4～36份。

作為優(yōu)選，所述發(fā)酵罐培養(yǎng)基包括以下重量配比的組分：玉米漿8～20份、蛋白胨1.6～4份、酵母提取物1.6～4份和醋酸鋅4～36份。

作為優(yōu)選，所述發(fā)酵罐培養(yǎng)基包括以下重量配比的組分：土豆8～20份、蛋白胨1.6～4份、酵母提取物1.6～4份和醋酸鋅4～36份。

作為優(yōu)選，所述子實體培養(yǎng)包括以下步驟：子實體培養(yǎng)基的制備、子實體培養(yǎng)基滅菌、接種、遮光密閉培養(yǎng)和采收；所述子實體培養(yǎng)基包括富硒大米、稻米谷蛋白的酶水解溶液和醋酸鋅。

子實體培養(yǎng)基中含有富硒大米，能夠提高培養(yǎng)出的蛹蟲草的蟲草素含量，而且富硒能力強，硒利用率更高，大幅度提高子實體硒含量，子實體硒含量可達(dá)42～57μg/g，是子實體培養(yǎng)基中采用普通大米所獲得的子實體中硒含量的10倍左右。蛹蟲草子實體產(chǎn)量更高，色澤鮮艷，提高了蛹蟲草的營養(yǎng)和藥用價值。此外，子實體培養(yǎng)基中還含有醋酸鋅，使培養(yǎng)出的子實體達(dá)到含鋅量達(dá)1150～1260mg/g，是子實體培養(yǎng)基中不采用醋酸鋅所獲得的子實體中鋅含量的10000～12000倍，可以起到補鋅的作用。

作為優(yōu)選，所述子實體培養(yǎng)基滅菌是指子實體培養(yǎng)基在高壓蒸汽中控溫120～125℃處理1小時，停止加熱后保溫1小時。

本發(fā)明通過在固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和發(fā)酵罐培養(yǎng)基加入醋酸鋅，在高濃度鋅離子脅迫下，提高蟲草素含量，既滿足了工業(yè)生產(chǎn)的要求，也符合現(xiàn)代消費者對食品營養(yǎng)和保健的要求。生產(chǎn)工序簡單，見效快，生產(chǎn)成本低；制備的蟲草營養(yǎng)價值高。

具體實施方式

實施例一：

一種提高蟲草素含量的蛹蟲草培養(yǎng)方法，包括菌絲體培養(yǎng)和子實體培養(yǎng)，所述菌絲體培養(yǎng)包括以下步驟：

（1）在固體培養(yǎng)基中進行菌種的活化：