[發(fā)明專利]一種藏降脂制劑的檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310539273.9
• 申請日: 2013-11-04
• 公開（公告）號: CN103604762A
• 公開（公告）日: 2014-02-26
• 發(fā)明（設計）人: 鄭亭亭;孫緒丁;任松鵬;趙延霞;楊文鈺
• 申請（專利權）人: 山東阿如拉藥物研究開發(fā)有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N30/02
• 代理公司: 濟南誠智商標專利事務所有限公司 37105
• 代理人: 王汝銀

技術領域

本發(fā)明涉及一種藏藥的檢測方法，具體涉及一種藏降脂制劑的檢測方法。

背景技術

藏降脂為藏醫(yī)用于除清血脂的代表藥方，至今已有300多年使用歷史。其組成為：藏錦雞兒39.3g、余甘子31.4g、短管兔耳草23.5g、紫檀香23.5g、印度獐牙菜23.5g、訶子23.5g、沙棘膏23.5g、大黃23.5g、塞北紫堇23.5g、甘青青蘭23.5g、干姜15.8g。經(jīng)過現(xiàn)代臨床試驗證明：藏降脂組方科學，療效顯著。藏降脂膠囊目前已被認定為青海省高新技術產(chǎn)品。

對于藏降脂的檢測方法，在藏降脂膠囊的現(xiàn)行質量標準WS-10864(ZD-0864)-2002-2012Z（簡稱“現(xiàn)行標準”）中，通過薄層定性鑒別齊墩果酸和大黃藥材，再通過薄層掃描法測定大黃酚的含量從而標定大黃的含量。專利《藏降脂制劑的質量控制方法》（申請?zhí)枺?01110188604.X）和文獻《藏降脂膠囊質量標準研究》（中成藥，2013年3期）介紹了相同的一種藏降脂制劑的控制方法，在執(zhí)行標準的基礎上，增加了薄層色譜法定性鑒別甘青青蘭，并將執(zhí)行標準中薄層掃描法測定大黃中大黃酚含量修訂為高效液相色譜法（簡稱“HPLC”）同時測定大黃中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚5種主要成分。

上述對于藏降脂制劑的檢測均是從原料入手，對部分藥材及其成分分別進行檢測，所選擇的檢測指標只代表藥方組成，不一定是產(chǎn)品療效必需的功效成分。目前尚缺少一種對于藏降脂制劑成品的總體有效成分進行檢測的方法。

黃酮類具有清除體內(nèi)自由基，改善血液循環(huán)，降低膽固醇的作用，為藏降脂方中多種藥材中共有的活性成分，也是藏降脂制劑中的主要有效成分之一。目前黃酮類的含量測定常用的是紫外-可見分光光度法測定總黃酮和高效液相色譜法對單種或多種黃酮單體進行含量測定，但藏降脂配方中藥材較多，黃酮類成分復雜，且其配方藥材中的部分成分（如藏錦雞兒及紫檀香中的色素）的干擾，現(xiàn)有技術中簡單的樣品處理方法和常用的檢測方法無法進行檢測。槲皮素為黃酮類的代表性成分，但槲皮素屬于黃酮苷的苷元，不經(jīng)過處理直接測定槲皮素的含量，不僅所得結果忽高忽低不準確，而且雜質的干擾非常厲害，無法正常檢測。

發(fā)明內(nèi)容

為克服現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提供了一種藏降脂制劑的檢測方法。

本發(fā)明的技術方案如下：

一種藏降脂制劑的檢測方法，通過測定藏降脂制劑中總黃酮的含量和測定藏降脂制劑中槲皮素的含量，構成對藏降脂制劑的檢測，測定方法如下：

總黃酮含量的測定：采用紫外-可見分光光度法測定，具體為：

a.對照品溶液的配置：精密稱取干燥至恒重的蘆丁對照品，加50%乙醇溶液配制成濃度為0.25mg/ml的溶液，即得；

b.標準曲線測算：精密吸取對照品溶液0、1、2、3、4、5、6ml，分別置于25ml容量瓶中，各加5％亞硝酸鈉溶液1.0ml搖勻，放置6min，加10％硝酸鋁溶液1.0ml搖勻，放置6min，加lmol/L氫氧化鈉溶液l0ml，再用75％乙醇溶液稀釋至刻度，放置15min后，在510nm處分別測定其吸光度，繪制標準曲線；

c.供試品溶液A的制備：精密稱取樣品細粉1g，加石油醚50ml索氏提取器回流提取至提取液無色，冷卻，棄去石油醚液，加70％乙醇50ml于50℃水浴浸提5h，再超聲提取1h，過濾，濾渣用70％乙醇洗滌3次，每次10ml，合并濾液與洗滌液，濃縮，拌入1-10g經(jīng)預處理的聚乙酰胺，以5倍于聚乙酰胺量的水洗脫，再用5倍于聚乙酰胺量95％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至干，再用70％乙醇定容至50ml，得供試品溶液A；

d.測定：精密吸取1ml待測溶液A置于25ml容量瓶中，按標準曲線測算項下的方法操作，由標準曲線求算含量；

槲皮素含量的測定：采用高效液相色譜法測定，具體為：

a.色譜條件與系統(tǒng)適用性：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數(shù)比45:55：1的甲醇-0.5%磷酸水溶液-異丙醇為流動相；檢測波長為360nm；理論板數(shù)按槲皮素峰計算應不低于2000；

b.對照品溶液的制備：取槲皮素對照品，精密稱定，加體積份數(shù)比3:1的乙醇-5mol/L鹽酸水溶液混合溶液制成每1ml含槲皮素150μg的溶液，即得；