[發明專利]外周血單核細胞基因中mRNA逆轉錄成DNA的方法在審
| 申請號: | 201310537861.9 | 申請日: | 2013-11-05 |
| 公開(公告)號: | CN103614366A | 公開(公告)日: | 2014-03-05 |
| 發明(設計)人: | 辛竹 | 申請(專利權)人: | 辛竹 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 116000 遼寧省大*** | 國省代碼: | 遼寧;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 外周血 單核 細胞 基因 mrna 逆轉錄 dna 方法 | ||
【權利要求書】:
1.外周血單核細胞基因中mRNA逆轉錄成DNA的方法,其特征在于,步驟如下:首先將目標片段選取模版,然后在PCR試管中配置反應體系;混合搖勻,高速離心;烤箱中孵育3分鐘,溫度為70-75攝氏度;冰上冷卻1分鐘;微量離心機簡短離心;放入三倍體積的緩沖液以及核糖核酸酶抑制劑、逆轉錄酶分別2倍體積;再次孵育,時間1-1.5小時;直接取至冰上,冷卻3-5分鐘后高速離心,于零下50-80溫度下保存即可。
2.如權利要求1所述的外周血單核細胞基因中mRNA逆轉錄成DNA的方法,其特征在于,再次孵育之前需要加入無水乙醇1-1.5倍體積。
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