[發明專利]一種水溶性米糠蛋白的提取方法

有效

• 申請號: 201310536586.9
• 申請日: 2013-11-04
• 公開（公告）號: CN103549110A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 楊濤;汪龍;李艷;林親錄;楊明琛;鄧錫云
• 申請（專利權）人: 中南林業科技大學
• 主分類號: A23J1/12
• 分類號: A23J1/12
• 代理公司: 長沙星耀專利事務所 43205
• 代理人: 寧星耀;許伯嚴

技術領域

本發明涉及一種米糠蛋白的提取方法，尤其是涉及一種采用超聲波輔助蛋白酶提取水溶性米糠蛋白的方法。

背景技術

我國是稻米生產大國，年產稻米達到1.8億噸以上，而米糠作為稻米加工副產品，年產量也超過1000萬噸（姚惠源,?周素梅,?王麗.?米糠與米糠蛋白質的開發利用[J].?無錫輕工業大學學報,?2002,?21(3):?312~316）。米糠是一種具有深度開發價值的資源，尤其是米糠蛋白具有低過敏原性、其氨基酸組成與?FAO/WHO?推薦模式接近，營養價值高，可與動物蛋白相媲美，可廣泛應用于嬰幼兒食品的開發（陳義勇,?王偉,?沈宗根,?等.?米糠與米糠蛋白深度開發現狀[J].糧食加工,?2006,?3(5):?24~25）。

目前，米糠蛋白的提取方法主要有堿法、物理法、酶法等（朱磊，汪學德，于新國等，米糠蛋白的綜合研究進展[J].中國油脂，2013（2）：81-83）。堿法工藝制備的米糠蛋白容易變性且提取率低，物理法提取率低，設備投資較高（江愛芝，王燕.米糠蛋白提取方法的研究進展[J].?農產品加工-創新版，?2009?(10)?:?35-37）。酶法主要采用蛋白酶，為了達到米糠蛋白良好的功能性及營養性，在使用蛋白酶時，需要控制較低的水解度（DH），提取工藝的難度大為增加?(馬海樂,張連波.米糠蛋白的脈沖超聲輔助提取技術[J].江蘇大學學報(自然科學版),2006(1):14~17)。以上三種方法提取的米糠蛋白水溶性較差，不利于人體的消化吸收，而且提取率低。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，克服現有技術的不足，以脫脂米糠為原料，提供一種制備效率高的水溶性米糠蛋白的提取方法，所得米糠蛋白純度高，水溶性良好。

本發明解決其技術問題采用的技術方案是，一種水溶性米糠蛋白的提取方法，包括以下步驟：

（1）脫脂米糠預處理：脫脂米糠過20-100目篩，按照料液比1:?10-40?(g:?mL)（優選1g:20mL）加入蒸餾水，采用市售食品級堿鹽將pH調節至7-10，得脫脂米糠水混合物；

（2）超聲波處理：將步驟（1）所得的脫脂米糠水混合物置于燒杯中，并將燒杯置于水浴鍋中，水浴溫度保持10~30℃（優選20℃），超聲波脈沖處理，超聲波功率為400-1200W（優選600W），脈沖工作時間1-4?s，?脈沖時間間隔1-4?s，總處理時間為30~100?min（優選60min）,此過程要采用pH計實時監測使得pH穩定在7-10；

（3）蛋白酶水解：先采用食品級鹽酸將步驟（2）處理后的混合物的pH調至5-9，加入相當于脫脂米糠原料質量的2-4%的蛋白酶進行酶解反應，酶解溫度為25-60℃（優選45℃），時間為2-4?h；

（4）離心分離、沉淀洗滌：將步驟（3）反應后得到的溶液在70-100?℃下滅酶5-20?min后，在2500~3500?r/min下離心10-20?min，收集上清液，采用食品級鹽酸調節pH至3.0-5.5，再次離心，所得沉淀即為水溶性米糠蛋白；

（5）冷凍干燥：對步驟（4）得到的蛋白沉淀水溶性米糠蛋白進行冷凍干燥處理；預凍速率為1-5℃/min，干燥室真空度為50~500?Pa，在-30~-10℃時預凍10-30?min，干燥至水分含量≤8?%，即得。

進一步，所述步驟（1）中的食品級堿鹽為碳酸鈉。

進一步，所述步驟（3）中的蛋白酶為米曲蛋白酶，所述蛋白酶的酶活為1×10^4?-4×10^4?U/g。

米糠蛋白提取率及功能特性評價方法：

①米糠蛋白含量及提取率的測定

蛋白質含量采用微量凱氏定氮法（AOAC.?Official?methods?of?analysis?[M].?15th?ed.?Washington?D?C:?Association?of?Official?Analytical?Chemists,1990）測定(換算系數為5.95)；提取率E=(W₁/W₀)×100%,式中W₁為提取物中蛋白質質量(g),W₀為米糠中蛋白質質量(g)。

②米糠蛋白水溶性評價方法

以米糠蛋白的溶解度表示，在?50mL超純水中加入?1g?被測米糠蛋白質樣品，25℃恒溫水浴鍋中保溫，并使用攪拌器攪拌?1h，懸浮液離心(3000r/min)?20min，上清液中蛋白質含量用雙縮脲法測定。按下式計算溶解性：??

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