[發明專利]新霉素半定量金標快速檢測試劑盒及其檢測方法和應用

無效

• 申請號: 201310529332.4
• 申請日: 2013-10-31
• 公開（公告）號: CN103743908A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發明（設計）人: 王麗哲;唐慧林;何艷玲;趙瑜;王麗麗;于重楠;劉敏;李瑾
• 申請（專利權）人: 北京陸橋技術有限責任公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于免疫學領域，涉及快速檢測食品中氨基糖苷類抗生素新霉素殘留的試劑盒和方法。?

背景技術

隨著經濟的發展和人們生活水平的提高，人們對食物的要求已不是簡單的填飽肚子，而是更多的關注食品的營養和安全。由于乳制品中除含有高質量蛋白質、脂肪、碳水化物外，還含有大量維生素和礦物質，被公認為迄今為止的一種比較理想的食品，因此乳和乳制品已成為人們非常喜愛的日常食品之一。?

從大環境上看，預計在未來三年，中國的城市化速度進一步加強，到2013年，中國的城市人口可能超過農村人口，成為真正的以城市消費帶動全國消費的國家。再加上城鄉人口可支配收入的不斷增加以及三農政策的進一步落實和西部大開發進入攻堅階段，在客觀環境上，給中國乳業的發展提供了更加良好的平臺。?

然而近幾年來，市場上頻繁出現劣質奶粉、勾兌酸奶、毒奶粉等惡性事件，乳品安全問題由此受到了全民的廣泛關注。自2008年以來乳制品安全問題層出不窮，在全國乃至全世界都造成了巨大的影響，給廣大消費者、乳制品行業以及眾多的奶牛養殖戶都帶來很大的損失。?

乳制品的安全必須從源頭抓起，通過各種檢測技術對質量進行層層控制。由于乳制品生產涉及的原料數量巨大、來源眾多，因此如何實現原料的快速流通，實現大量原料奶樣品準確快速的篩選，是目前檢測技術急需突破的難點之一。?

新霉素(neomycin,NEO)屬于氨基糖苷類抗生素(aminoglycosides),是由新霉胺和新霉二糖胺結合而成的，其抗菌譜廣,對革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、結核桿菌、抗酸菌等均有良好的抑制作用。新霉素作為一種常用獸藥,常用于抑制畜禽的細菌性胃腸道感染。隨著新霉素在國內外養殖業中越來越廣泛地應用,其在動物源性食品中的殘留問題也日益突出。當其殘留量超過一定范圍時會對人和動物產生潛在的耳毒性和腎毒性,給人類健康造成了很大威脅。?

我國農業部235號公告(2002)規定的新霉素最高殘留限量為:牛奶、羊奶500μg/kg,雞蛋500μg/kg,牛、羊、豬、雞、火雞、鴨的肌肉、脂肪、肝臟500μg/kg,牛、羊、豬、雞、火雞、鴨的腎臟10000μg/kg。目前,新霉素的殘留檢測方法主要包括微生物法、高效液相色譜法和免疫學測定法。這幾種方法各有優勢，但都不能用于大量樣品的快速篩選檢測。?

免疫層析測試技術是九十年代初發展起來的一項新技術，因其具有簡便、快速、直觀、敏感、高特異性等特點，在臨床診斷等諸多領域已得到廣泛應用，主要用于快速檢測血清或尿樣中的抗原成分；也可用于檢測樣品中的致病菌和其它有害成分等。目前也已在該方法靈敏度高和特異性強，反應快速，操作簡便，不需任何特殊儀器設備，適用于大量樣品的快速篩查和現場檢測。?

中國專利CN102778563A公開了一種膠體金試紙條，該試紙條由吸收墊、硝酸纖維素膜、金標墊、樣品墊依次層疊黏貼在塑料襯板上構成，硝酸纖維素膜上設有檢測線和質控線，金標墊包被有膠體金標記的能識別新霉素，阿米卡星和巴龍霉素的單克隆抗體。該發明還公開了一種膠體金試紙條的使用方法及其在新霉素殘留檢測中的應用。該發明可用于對牛奶、雞肉、豬肉、蝦肉、牛肉、羊肉、豬肝等組織樣品進行新霉素殘留快速檢測，最低檢測限為500μg/L，但低于農業部235公告中對新霉素在牛奶中的殘留限量400ng/kg的規定，且不能夠進行半定量檢測。?

綜上所述，現有免疫層析技術的應用仍然存在無法實現殘留物的半定量檢測、檢測方法繁瑣、檢測耗時長、在實際工作中應用局限性大等缺陷。?

發明內容

本發明的首要目的是提供一種食品中新霉素半定量快速檢測試劑盒，利用免疫層析技術實現牛奶等樣品中新霉素殘留的半定量檢測，使之具備當前快速檢測產品所有優點的同時能夠實現殘留物的半定量檢測，并且檢測方法簡單、時間短，可廣泛應用于實際工作，為新霉素的殘留檢測提供了一種更安全、更簡便的檢測試劑盒及其檢測方法。?

為了達到上述目的，本發明采用以下技術方案：?

一種新霉素半定量金標快速檢測試劑盒，包括樣品稀釋液、酶標板和試紙條，所述試紙條由樣品墊、金標抗體結合墊、硝酸纖維素膜、吸水墊順次搭接黏貼在底襯上，樣品墊和金標抗體結合墊上包被有MAX線。?

所述金標抗體結合墊上包被膠體金顆粒標記的新霉素單克隆抗體；?