[發明專利]HPLC同時測定裸花紫珠制劑中三種苯乙醇苷類成分的方法

有效

• 申請號: 201310528326.7
• 申請日: 2013-10-30
• 公開（公告）號: CN104597139A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: 李典鵬;盧鳳來;顏小捷;谷陟欣;黃勝;張妮瑜;袁莉;任潔芳
• 申請（專利權）人: 九芝堂股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
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技術領域

本發明屬于藥物檢測技術領域，特別涉及同時測定裸花紫珠制劑中三種苯乙醇苷類成分的方法。

背景技術

裸花紫珠制劑如裸花紫珠片、裸花紫珠栓、裸花紫珠分散片等，具有鎮痛、消炎、解毒、收斂止血等功效，其藥效是多種活性成分共同作用的結果，目前裸花紫珠制劑如裸花紫珠片的檢測的方法主要為以分光光度法測定總黃酮含量，以高效液相法測定指標性成分如木犀草素、毛蕊花糖苷、連翹酯苷等。紫珠屬化學成分研究表明苯乙醇苷類成分是該屬植物的主要成分類群之一。申請人通過研究也發現連翹酯苷B、毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷是裸花紫珠片的主要成分。同時現代藥理研究表明連翹酯苷B、毛蕊花糖苷與異毛蕊花糖苷具有抗血栓、降血脂、抗氧化、抑制肝細胞毒性和調節非特異性免疫反應等多方面的作用。但目前還沒有同時測定這三種成分的文獻報道?！吨谐伤帯?011年3月收載的陳德金等《HPLC法測定裸花紫珠片中毛蕊花糖苷及連翹酯苷的含量》，其樣品處理繁瑣，且沒有檢測出主要成分異毛蕊花糖苷等問題。

發明內容

本發明的目的就是針對裸花紫珠制劑的檢測現狀，為有效地控制裸花紫珠制劑的內在質量，提供一種同時測定裸花紫珠制劑中三種苯乙醇苷類成分的方法，有利于對裸花紫珠制劑產品質量的有效控制及保證其臨床療效。

一種同時測定裸花紫珠制劑中三種苯乙醇苷類成分的方法，包括如下步驟：

（1）對照品溶液的制備：

分別稱取連翹酯苷、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷對照品，置于容量瓶中，加25%～75%乙醇或甲醇，超聲溶解并定容至刻度，搖勻，制成對照品溶液；

（2）供試品溶液的制備：

裸花紫珠制劑供試品溶液的制備：取裸花紫珠制劑，置錐形瓶中，加25%～75%乙醇或甲醇，稱重，超聲處理30～90min，放冷，再稱定重量，用同種溶劑補重，搖勻，用微孔濾膜濾過，取續濾液，即得裸花紫珠制劑供試品溶液；

（3）HPLC檢測：

分別吸取步驟（1）和（2）所得的裸花紫珠對照品溶液和裸花紫珠制劑供試品溶液，分別注入高效液相色譜儀中進行測定；

其中，色譜條件為：色譜柱為C₁₈反相色譜柱；紫外檢測器；柱溫為30～35℃；檢測波長為320～340nm；流動相A為乙腈，流動相B為0.1～0.5%磷酸溶液，流速為0.8～1.2ml/min；分析時間25分鐘；等度洗脫，流動相A:流動相B＝18～20:82～80。

所述步驟（1）供試品溶液的制備優選為下述方法進行：

分別稱取連翹酯苷對照品11.70mg、毛蕊花糖苷對照品23.15mg、異毛蕊花糖苷對照品26.75mg，置于容量瓶中，加25%～75%乙醇或甲醇，超聲溶解并定容至刻度，搖勻，制成對照品溶液。

所述步驟（2）供試品溶液的制備優選為下述方法進行：

a、裸花紫珠制劑為片劑、膠囊劑、顆粒劑、栓劑：取裸花紫珠制劑內容物，研細，稱取0.1～3g，置錐形瓶中，加25%～75%乙醇或甲醇25～100ml，稱重，超聲處理30～90min，放冷，再稱定重量，用同種溶劑補重，搖勻，用微孔濾膜濾過，取續濾液，即得裸花紫珠制劑供試品溶液；

b、裸花紫珠制劑為合劑、口服液：取裸花紫珠制劑混勻，精密量取5～10ml，置25～100ml容量瓶中，加25%～75%乙醇或甲醇20～90ml，超聲處理30～90min，放冷，用同種溶劑稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，取續濾液，即得裸花紫珠制劑供試品溶液。

所述步驟（3）中的色譜柱優選柱長為250mm的C₁₈反相色譜柱。

所述步驟（3）中檢測波長優選為327nm。

所述步驟（3）中流動相B優選為0.4%磷酸溶液。

所述步驟（3）中流速優選為1ml/min。

所述步驟（1）和（2）中乙醇或甲醇濃度優選為50%。

所述步驟（3）中流動相A:流動相B的體積比優選為18.2:81.8。

所述步驟（2）中超聲處理時間優選為45分鐘。

本發明所述裸花紫珠制劑為：片劑、膠囊劑、顆粒劑、栓劑、合劑、口服液。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：本發明方法的操作簡便、準確度高、專屬性好、精密度較高、重現性良好，有利于保證裸花紫珠制劑的質量穩定和臨床療效。

附圖說明

圖1為檢測波長3D圖；

圖2為三種標準品的HPLC色譜圖；

圖3為裸花紫珠片HPLC色譜圖；