[發明專利]同時檢測心型脂肪酸結合蛋白和肌鈣蛋白I的快速定量檢測裝置及檢測方法

在審

• 申請號: 201310524449.3
• 申請日: 2013-10-17
• 公開（公告）號: CN103543272A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 李洲;楊發青;周鴻銳
• 申請（專利權）人: 天津中新科炬生物制藥有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/558;G01N33/532
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種同時檢測心型脂肪酸結合蛋白和肌鈣蛋白I的快速定量檢測裝置及檢測方法，其特征在于裝置由相互獨立的心型脂肪酸結合蛋白(FABP)和肌鈣蛋白I(CTNI)檢測試紙、雙聯卡殼和內置了相應標準曲線和判定方法的免疫層析結果判讀記錄儀組成。

2.根據權利要求1所述的檢測裝置，其特征在于FABP檢測試劑試紙由含有膠體金標記的抗人FABP抗體的膠體金墊、包被有配對FABP抗體(T線)和抗鼠IgG(C線)的NC膜、樣品墊、吸樣墊和塑料底板組成。CTNI檢測試劑試紙由含有膠體金標記的抗人CTNI抗體的膠體金墊、包被有配對CTNI抗體(T線)和抗鼠IgG(C線)的NC膜、樣品墊、吸樣墊和塑料底板組成。每個試紙的寬度為3-5mm，長度為7-8cm。樣品墊、膠體金墊、NC膜和吸樣墊從塑料底板一端依次排列至另一端。

3.根據權利要求1所述的檢測裝置，其特征在于雙聯卡殼包含上蓋和下蓋兩個部分，內部可平行放置兩條檢測試紙。卡殼上蓋的下部對應樣品墊部分設置了樣品孔和稀釋液孔，用于加入樣本和稀釋液，卡殼上蓋的中間部分應對試紙NC膜中部設置了視窗口，用于觀察NC膜上的C、T線，判定結果。

4.根據權利要求1和2所述的檢測裝置，其特征在于所述NC膜是一種由硝酸纖維素構成的多孔結構的膜，孔徑為8-12um。稀釋液墊為玻璃纖維膜或無紡布，吸樣墊為吸水濾紙。

5.根據權利要求1所述的檢測裝置，其特征在于包被有配對抗體的NC膜制備過程為：以0.01M?pH7.4磷酸鹽緩沖液(PBS)將配對的FABP或CTNI抗體配制成合適的濃度，在噴膜儀在NC膜上以1.2-1.5ul/cm的參數進行劃線，包被T線，同時在NC膜上部包被1-2mg/ml的抗鼠IgG作為C線。干燥，備用。

6.根據權利要求1和2所述檢測裝置，其特征在于膠體金墊的制備過程為：取100ml膠體金液放在燒杯內，用0.2M?K₂CO3調至pH7.5-8.5，再加入0.5-1.5mg標記用FABP或CTNI抗體，室溫攪拌30min，封閉，12000rpm離心30分鐘，棄上清，用工作液復溶至50ml，然后用噴金機分別均勻地噴涂在膠體金墊上，干燥備用。

7.根據權利要求1和2所述的檢測裝置，其特征在檢測卡裝配方法為：在相對濕度小于40％的條件下，取塑料底板，將已包被FABP或CTNI的NC膜粘貼在底板的中部，在NC膜T線一側粘貼膠體金墊，在膠體金墊另一側粘貼樣品墊；在NC膜C線一側粘貼吸樣墊；各粘貼組分接口相互疊壓1-2mm，粘貼好的大板切成3-5mm寬的試紙條。然后將兩種試紙條分別放置于卡殼下蓋的槽中，然后蓋上上蓋，壓緊，完成裝配。

8.根據權利要求1所述的檢測裝置，其特征在于免疫層析結果判讀記錄儀是一種光學檢測系統，內置了對FABP和CTNI試紙的標準曲線和判定方法，用于對檢測結果的定量判定，對FABP和CTNI檢測范圍分別為5-200ng/mL和1-100ng/mL。

9.根據權利要求1所述的檢測裝置，其特征在于檢測方法為：檢測時將50ul的被檢樣本如血清、血漿、全血加入到樣本孔中，然后在稀釋液孔中加入50ul樣品稀釋液，在15-20分鐘內，用免疫層析結果判讀記錄儀對檢測結果進行判定。