[發明專利]雜交瘤細胞株及其產生的抗Wnt5a單克隆抗體與應用無效
| 申請號： | 201310516066.1 | 申請日： | 2013-10-28 |
| 公開（公告）號： | CN103555668A | 公開（公告）日： | 2014-02-05 |
| 發明（設計）人： | 司維柯;張曉麗;趙宸;牛長春;楊忠;吳韋銣;潘靜 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍第三軍醫大學第一附屬醫院 |
| 主分類號： | C12N5/20 | 分類號： | C12N5/20;C07K16/18;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/574 |
| 代理公司： | 重慶志合專利事務所 50210 | 代理人： | 胡榮琿 |
| 地址： | 400038 重*** | 國省代碼： | 重慶;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 雜交瘤 細胞株 及其 產生 wnt5a 單克隆抗體 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種雜交瘤細胞株，其保藏號為：CCTCC?NO:C2013112。
2.一種抗Wnt5a的單克隆抗體，由權利要求1所述的雜交瘤細胞株分泌產生。
3.權利要求2所述的單克隆抗體在制備檢測人外周血細胞系和骨髓中wnt5a的表達差異的制劑中的應用。
4.權利要求2所述的單克隆抗體在制備檢測人外周血細胞系和骨髓中wnt5a的免疫印跡試劑中的應用。
5.權利要求2所述的單克隆抗體在制備檢測人體骨髓和血液中白血病變制劑中的應用。
6.權利要求2所述的單克隆抗體在制備檢測人白血病的診斷試劑中的應用。
7.一種權利要求1所述的雜交瘤細胞株的制備方法，其特征在于，包含步驟：
1）以人臍帶血有核細胞的總RNA為模板，根據SEQ?ID?NO:1所示的Wnt5a序列設計引物序列，擴增獲得目的Wnt5a抗原序列；
2）將所述目的Wnt5a抗原序列酶切后與原核表達載體連接后誘導表達Wnt5a抗原蛋白；
3）根據表達的Wnt5a抗原蛋白合成多肽SEQ?ID?NO:4-9，并分別偶聯KLH；
4）將偶聯后的多肽免疫小鼠；
5）吸取骨髓瘤細胞懸液和來源于偶聯后的多肽免疫小鼠的脾臟B淋巴細胞懸液進行細胞融合；
6）培養融合后的細胞，測雜交瘤效價，篩選陽性細胞株，獲得所述雜交瘤細胞株。
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