[發明專利]一種鷹嘴豆抑菌肽的制備方法

有效

• 申請號: 201310515764.X
• 申請日: 2013-10-28
• 公開（公告）號: CN103525891A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發明（設計）人: 田洪磊;詹萍;程衛東;朱新榮;顏海燕
• 申請（專利權）人: 石河子大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34
• 代理公司: 北京鼎佳達知識產權代理事務所(普通合伙) 11348
• 代理人: 王偉鋒;劉鐵生

技術領域

本發明涉及植物蛋白提取技術領域，特別是涉及一種鷹嘴豆抑菌肽的制備方法。

背景技術

隨著廣大消費者對食品傳統防腐劑抑菌效力、呈味特征及安全性的普遍認識，安全性與穩定性高、抑菌性與溶解性強并且抑菌范圍廣的天然防腐劑的發掘與開發引起了廣大學者的廣泛關注，尤其是抑菌肽類防腐劑。將鷹嘴豆蛋白粉作為營養滋補及藥物配伍資源，已得到了廣大消費者尤其是新疆少數民族居民的認可，以安全性普遍認知的鷹嘴豆蛋白作為肽源進行抑菌肽開發，可為鷹嘴豆蛋白副產物的應用及精深加工提供基礎依據，輔助于防腐類食品添加劑市場開拓與品質升級。作為純天然食品配料的植物蛋白，其水解液富含多種氨基酸和肽，可為食品帶來不同的功能特征。

目前應用于食品保鮮領域的抑菌肽主要以乳酸鏈球菌素為主，日本、韓國將多聚賴氨酸作為食品添加劑用于食品貯藏保鮮。基于天然防腐劑抑菌的廣譜性能考慮，多種抑菌肽的開發與應用已得到廣大學者的普遍關注，采用化學合成及基因工程的方法實施抑菌肽的制備最為常見，然而由于化學合成高成本低效率、基因工程表達系統不確定等問題的存在，限制了食品添加劑類抑菌肽在食品加工中的應用。

發明內容

本發明的目的是提出一種鷹嘴豆抑菌肽的制備方法，以克服現有抑菌肽制備方法的不足，提高抑菌肽段的富集效果。

為了解決上述技術問題，本發明采用了如下技術方案：一種鷹嘴豆（Cicer?arietinum?Linn.）抑菌肽的制備方法，包括以下步驟：

步驟1，將過50～65目篩的鷹嘴豆蛋白粉與水混合制成3～8重量%的鷹嘴豆蛋白粉懸浮液，于35℃下靜置浸泡20～40min；

步驟2，調整鷹嘴豆蛋白粉懸浮液的pH值為6.0～7.5，按每克鷹嘴豆蛋白粉加入3000-4000U復合酶形成酶解體系，所述復合酶為胰蛋白酶與風味蛋白酶復合按重量比1:1～3混合形成的復合酶；

步驟3，所述酶解體系在45～50℃的溫度條件下密閉反應1.0～1.5h，反應結束后立即將酶解體系溫度升高至≥95℃滅酶10～15min，獲得酶解產物；

步驟4，對所述酶解產物離心分離10～15min獲得上清液和未水解蛋白沉淀，用截留量分別為6kDa和2kDa的超濾膜對上清液進行不同分子量肽段截留，獲得分子量在2kDa-6kDa之間的肽段體系；對肽段體系進行噴霧干燥得到鷹嘴豆抑菌肽。

如上所述的鷹嘴豆抑菌肽的制備方法，進一步，步驟2，調整鷹嘴豆蛋白粉懸浮液的pH值為6.3～7.0。

如上所述的鷹嘴豆抑菌肽的制備方法，進一步，按每克鷹嘴豆蛋白加入粉3500-3800U復合酶形成酶解體系。

如上所述的鷹嘴豆抑菌肽的制備方法，進一步，所述復合酶為胰蛋白酶與風味蛋白酶復合按重量比1:2混合形成的復合酶。

如上所述的鷹嘴豆抑菌肽的制備方法，進一步，步驟3，所述酶解體系在45～50℃的溫度條件下密閉反應1.2h。

如上所述的鷹嘴豆抑菌肽的制備方法，進一步，反應結束后立即將酶解體系溫度升高至95℃滅酶12min，獲得酶解產物。

如上所述的鷹嘴豆抑菌肽的制備方法，進一步，步驟4，對所述酶解產物離心分離的離心速度為1900～2200r/min。

與現有技術相比，本發明的有益效果在于：

通過本發明方法制備抑菌肽，生產成本較低、工藝操作簡單、設備及人力投資小、重復性好，減少了水資源的浪費與污染，同時可使酶解產物中抑菌肽段產量提高。通過本發明制得的抑菌肽不僅具有較為顯著的抑菌效果而且安全營養，為天然保鮮劑的開發提供可靠的基料或配料，可以提高我國防腐劑產品的重量和安全性，適應天然食品添加劑市場發展的要求。此外，通過本發明方法制備的抑菌肽分子量分布集中，抑菌活性較強，食用安全性高。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步詳細描述，但不作為對本發明的限定。

實施例1