[發明專利]一種與伊犁馬乳用性狀相關的SNP標記及其檢測方法有效
| 申請號: | 201310514883.3 | 申請日: | 2013-10-25 |
| 公開(公告)號: | CN103740805A | 公開(公告)日: | 2014-04-23 |
| 發明(設計)人: | 劉武軍;邵勇鋼;王瓊;莫合塔爾·夏甫開提;孟軍;耿明;劉玲玲 | 申請(專利權)人: | 劉武軍;新疆農業大學 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 烏魯木齊新科聯專利代理事務所(有限公司) 65107 | 代理人: | 歐詠 |
| 地址: | 830052 新疆維吾*** | 國省代碼: | 新疆;65 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 伊犁 馬乳用 性狀 相關 snp 標記 及其 檢測 方法 | ||
1.一種與伊犁馬乳用性狀相關的SNP標記及其檢測方法,其特征在于:
1)提取待測伊犁馬的基因組DNA;根據GenBank登錄號為BIEC2-560774的序列,設計合成引物,上游引物為5'-?GGTTGCTATTCTGGGCTTTG-3',下游引物為5'-TGTGTTGGGATGGACAAAAA-3'?;擴增片段大小為194bp,最適退火溫度為57.1℃;
2)以待測伊犁馬的基因組DNA為模板,對設計引物進行PCR擴增;
反應體系:PCR?Mixture?10.0μl,上下游引物各0.4μl,DNA模板1.5μl,加水至總體積20μl;
反應條件:94℃預變性5min,94℃變性30s、57.1℃?30s、72℃延伸1min,循環30次,72℃延伸5min,4℃保存;
3)對擴增的PCR產物,進行SSCP檢測;其中電泳的電壓180?V,電流50?mA,時間10?h;
4)選取個體的?PCR產物,送往上海生物工程技術有限責任公司進行DNA測序,判定位于馬21號染色體上第29764513位的堿基G的伊犁馬日均產奶量顯著高于堿基為A的伊犁馬日均產奶量。
2.依據權利要求1所述SNP標記及其應用,其特征在于:選擇基因型為AB、BB的個體,用于乳用馬品種的培育。
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