[發(fā)明專利]TERT啟動(dòng)子的單核苷酸多態(tài)性序列的檢測(cè)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310514526.7
• 申請(qǐng)日: 2013-10-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103571953A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳松;黃嫻;王波;蔡志明;梅紅兵
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳市第二人民醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 深圳市合道英聯(lián)專利事務(wù)所(普通合伙) 44309
• 代理人: 廉紅果;謝成毅

1.一種TERT啟動(dòng)子的單核苷酸多態(tài)性序列的檢測(cè)方法，包括下述步驟：

????以包含TERT啟動(dòng)子基因的待測(cè)基因組DNA為模板，以引物對(duì)P為引物，?PCR擴(kuò)增TERT啟動(dòng)子基因，所述引物對(duì)P為：

????TF：5’CAGCGCTGCCTGAAACTC3’?

????TR：5’GTCCTGCCCCTTCACCTT3’；

PCR擴(kuò)增完成后，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行sanger測(cè)序，檢測(cè)得到TERT啟動(dòng)子的單核苷酸多態(tài)性，所述單核苷酸多態(tài)性序列包括：

TERT啟動(dòng)子chr5,?1,295,228位為C或T的堿基多態(tài)性序列；

TERT啟動(dòng)子chr5,?1,295,242-1,295,243位為CC或TT的堿基多態(tài)性序列；

TERT啟動(dòng)子chr5,?1,295,250位為C或T的堿基多態(tài)性序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種TERT啟動(dòng)子的單核苷酸多態(tài)性序列的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的PCR反應(yīng)體系體積為20μl，含有dNTP?2?μl、10×PCR?Buffer?2?μl?、TF(10?μM)?1μl、TR(10?μM)?1μl、模板DNA?1μl、dH₂O?12.5μl和TaKaRa?Taq?HS?0.5μl。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種TERT啟動(dòng)子的單核苷酸多態(tài)性序列的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序?yàn)椋?3℃2分鐘預(yù)變性，然后按93℃?1分鐘，55℃1分鐘，72℃1分鐘，共40做個(gè)循環(huán)，最后72℃7分鐘延伸。