[發明專利]TERT啟動子的單核苷酸多態性序列的檢測方法

無效

• 申請號: 201310514526.7
• 申請日: 2013-10-28
• 公開（公告）號: CN103571953A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 吳松;黃嫻;王波;蔡志明;梅紅兵
• 申請（專利權）人: 深圳市第二人民醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 深圳市合道英聯專利事務所(普通合伙) 44309
• 代理人: 廉紅果;謝成毅

1.一種TERT啟動子的單核苷酸多態性序列的檢測方法，包括下述步驟：

????以包含TERT啟動子基因的待測基因組DNA為模板，以引物對P為引物，?PCR擴增TERT啟動子基因，所述引物對P為：

????TF：5’CAGCGCTGCCTGAAACTC3’?

????TR：5’GTCCTGCCCCTTCACCTT3’；

PCR擴增完成后，對PCR產物進行sanger測序，檢測得到TERT啟動子的單核苷酸多態性，所述單核苷酸多態性序列包括：

TERT啟動子chr5,?1,295,228位為C或T的堿基多態性序列；

TERT啟動子chr5,?1,295,242-1,295,243位為CC或TT的堿基多態性序列；

TERT啟動子chr5,?1,295,250位為C或T的堿基多態性序列。

2.根據權利要求1所述的一種TERT啟動子的單核苷酸多態性序列的檢測方法，其特征在于，所述的PCR反應體系體積為20μl，含有dNTP?2?μl、10×PCR?Buffer?2?μl?、TF(10?μM)?1μl、TR(10?μM)?1μl、模板DNA?1μl、dH₂O?12.5μl和TaKaRa?Taq?HS?0.5μl。

3.根據權利要求1所述的一種TERT啟動子的單核苷酸多態性序列的檢測方法，其特征在于，所述的PCR擴增反應程序為：93℃2分鐘預變性，然后按93℃?1分鐘，55℃1分鐘，72℃1分鐘，共40做個循環，最后72℃7分鐘延伸。