[發(fā)明專利]AG22多肽的完全抗原及其制備方法和抗體無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201310514525.2 | 申請(qǐng)日： | 2013-10-25 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN103524629A | 公開(kāi)（公告）日： | 2014-01-22 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 任培根;郭成志;李健;郭小勇 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院 |
| 主分類號(hào)： | C07K19/00 | 分類號(hào)： | C07K19/00;C07K1/107;C07K16/18 |
| 代理公司： | 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224 | 代理人： | 吳平 |
| 地址： | 518055 廣東省深圳*** | 國(guó)省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | ag22 多肽 完全 抗原 及其 制備 方法 抗體 | ||
1.一種AG22多肽的完全抗原，其特征在于，所述AG22多肽的完全抗原由AG22多肽和交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白偶聯(lián)形成；
其中，所述AG22多肽的序列為SEQ?ID?No.1所示的序列，所述AG22多肽通過(guò)半胱氨酸與所述交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白偶聯(lián)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的AG22多肽的完全抗原，其特征在于，所述AG22多肽與所述交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白的摩爾比為800～1000：1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的AG22多肽的完全抗原，其特征在于，所述交聯(lián)劑為馬來(lái)酰亞胺。
4.一種AG22多肽的完全抗原的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
提供交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白，并用磷酸鈉緩沖液對(duì)所述交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白進(jìn)行重構(gòu)，得到重構(gòu)后的交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白溶液；
提供AG22多肽，并將所述AG22多肽用偶聯(lián)緩沖液或雙蒸水溶解，得到AG22多肽溶液；
將所述重構(gòu)后的交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白溶液和所述AG22多肽溶液混勻后充分反應(yīng)，分離純化后得到由所述AG22多肽和所述交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白偶聯(lián)形成AG22多肽的完全抗原，其中，所述AG22多肽的序列為SEQ?ID?No.1所示的序列，所述AG22多肽通過(guò)半胱氨酸與所述交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白偶聯(lián)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的AG22多肽的完全抗原的制備方法，其特征在于，所述交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白溶液的濃度為5mg/mL；
所述AG22多肽溶液的濃度為8mg/mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的AG22多肽的完全抗原的制備方法，其特征在于，將所述重構(gòu)后的交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白溶液和所述AG22多肽溶液混勻的操作中，所述AG22多肽與所述交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白的摩爾比為800～1000：1。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的AG22多肽的完全抗原的制備方法，其特征在于，所述交聯(lián)劑為馬來(lái)酰亞胺。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的AG22多肽的完全抗原的制備方法，其特征在于，分離純化后得到由所述AG22多肽和所述交聯(lián)劑活化的匙孔血藍(lán)蛋白偶聯(lián)形成AG22多肽的完全抗原的操作為：
用30mL含有質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.01%的疊氮鈉PBS緩沖液平衡Sephadex?G-25M凝膠柱，接著向所述Sephadex?G-25M凝膠柱加入反應(yīng)液，用總體積10mL的所述PBS緩沖液洗滌，收集洗出液，每次收集0.5mL～1.0mL，在280nm下測(cè)量吸光度值，根據(jù)吸光度值收集含蛋白洗脫液。
9.一種AG22多肽的完全抗原的抗體，其特征在于，所述AG22多肽的完全抗原的抗體與如權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)所述的AG22多肽的完全抗原特異性結(jié)合。
10.一種AG22多肽的完全抗原的抗體，其特征在于，所述AG22多肽的完全抗原的抗體為如權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)所述的AG22多肽的完全抗原作為抗原被免疫系統(tǒng)識(shí)別后表達(dá)得到的抗體，所述AG22多肽的完全抗原的抗體為多克隆抗體或單克隆抗體。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的AG22多肽的完全抗原的抗體，其特征在于，所述AG22多肽的完全抗原的抗體為兔源的多克隆抗體。
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