[發明專利]一種耐鹽脫氮復合菌劑及其制備和使用方法

有效

• 申請號: 201310510802.2
• 申請日: 2013-10-27
• 公開（公告）號: CN103589669A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發明（設計）人: 唐婧;陳金楠;傅金祥;肖亞男
• 申請（專利權）人: 沈陽建筑大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/07;C12R1/01
• 代理公司: 沈陽東大專利代理有限公司 21109
• 代理人: 梁焱

1.一種耐鹽脫氮復合菌劑，其特征在于由具有反硝化特性且脫氮過程中有亞硝氮積累的鹽單胞菌、具有反硝化特性且脫氮過程中無亞硝氮積累的鹽單胞菌、具有硝化特性的芽胞桿菌和具有耐鹽特性的鹽單胞菌按照體積比1:1:（10~20）:（60~85）混合組成。

2.如權利要求1所述的一種耐鹽脫氮復合菌劑的制備方法，其特征在于按照以下步驟進行：

（1）將具有耐鹽特性的鹽單胞菌、具有硝化特性的芽胞桿菌、具有反硝化特性且脫氮過程中有亞硝氮積累的鹽單胞菌和具有反硝化特性且脫氮過程中無亞硝氮積累的鹽單胞菌分別接種于固體培養基上進行活化；

（2）用接菌環取上述活化的四種菌落分別接種于相應的液體培養液中，在30℃、125r/min條件下進行恒溫振蕩，并在好氧條件下培養1~2天，獲得四種液體菌劑種子液；

（3）將上述種子液擴大培養后，將擴大培養的具有反硝化特性且脫氮過程中有亞硝氮積累的鹽單胞菌、具有反硝化特性且脫氮過程中無亞硝氮積累的鹽單胞菌、具有硝化特性的芽胞桿菌和具有耐鹽特性的鹽單胞菌按照體積比1:1:（10~20）:（60~85）體積比混合，即為得到耐鹽脫氮復合菌劑；

或者將步驟（2）中得到的四種液體菌劑種子液按照體積比1:1:（10~20）:（60~85）混合，再進行擴大培養。

3.根據權利要求2所述的一種耐鹽脫氮復合菌劑的制備方法，其特征在于所述的具有耐鹽特性的鹽單胞菌的液體培養液配方為：牛肉膏：10g/L，蛋白胨：10g/L，NaCl：26.726g/L，MgSO₄：3.248g/L，MgCl₂：2.26g/L，CaCl₂：11.53g/L，NaHCO₃：0.198g/L，KCl：0.721g/L；步驟（1）中所述的活化用固體培養基是在上述成分中加入占總重量加2%的瓊脂粉。

4.根據權利要求2所述的一種耐鹽脫氮復合菌劑的制備方法，其特征在于所述的具有硝化特性的芽胞桿菌的液體培養液配方為：NaNO₂：1g/L，MnSO₄.H₂O：0.01g/L，K₂HPO₄：0.75g/L，Na₂CO₃：1g/L，KH₂PO₄：0.75g/L，維生素液：2mL/L，微量元素液：2mL/L，NaCl：26.726g/L，MgSO₄：3.248g/L，MgCl₂：2.26g/L，CaCl₂：1.153g/L，NaHCO₃：0.198g/L，KCl：0.721g/L；步驟（1）中所述的活化用固體培養基是在上述成分中加入占總重量加2%的瓊脂粉。