[發明專利]一種高產型烏膚雞品系的培育方法

有效

• 申請號: 201310507256.7
• 申請日: 2013-10-24
• 公開（公告）號: CN103563849A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 康相濤;田亞東;楊朋坤;韓瑞麗;王丹丹;李轉見;孫桂榮;蔣瑞瑞;呂世杰;閆峰賓;王彥彬;劉小軍;李國喜;黃艷群;郭晗;許殿明;李孝法;索智勇
• 申請（專利權）人: 河南農業大學
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 牛愛周

1.一種高產型烏膚雞品系的培育方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）利用烏膚雞品種作為父本與高產蛋雞品種作為母本進行雜交，生產出F1代雞；

（2）F1代自交得到F2代，選留F2代烏膚雞；

（3）利用熒光定量PCR測定F2代烏膚雞EDN3基因的相對拷貝數，確定F2代烏膚雞個體的基因型，選留烏膚位點為FmFm基因型的個體，淘汰烏膚位點為Fmfm基因型的個體；

（4）對得到的FmFm基因型個體進行橫交和擴繁，按照家系選擇和個體選擇方法，提高產蛋量，同時提純和固定烏膚性狀，經過4個世代以上的選育后，得到烏膚位點為FmFm基因型的高產型烏膚雞品系。

2.根據權利要求1所述的高產型烏膚雞品系的培育方法，其特征在于：所述步驟（1）中的烏膚雞品種為絲羽烏骨雞、江山烏骨雞、金湖烏鳳雞、余干烏骨雞、鄖陽烏骨雞、雪峰烏骨雞、四川山地烏骨雞、烏蒙烏骨雞、騰沖雪雞、略陽雞、他留烏骨雞、無量山烏骨雞或鹽津烏骨雞。

3.根據權利要求1所述的高產型烏膚雞品系的培育方法，其特征在于：所述步驟（1）中的高產蛋雞品種為白來航、羅曼、海蘭、海賽克斯、尼克、巴布考克、黑康、特佳、雪佛、伊莎、京紅、京粉、河北大午、農大3號、新楊褐或新楊白。

4.根據權利要求1所述的高產型烏膚雞品系的培育方法，其特征在于：所述步驟（3）中利用熒光定量PCR測定F2代烏膚雞EDN3基因的相對拷貝數，確定F2代烏膚雞個體基因型的方法，包括以下步驟：以包含EDN3基因的待測雞全血基因組DNA為模板，以引物對P為引物進行熒光定量PCR擴增，擴增片段的DNA序列如SEQ?ID?No.3所示；

所述的引物對P為：

上游引物P-F：5’-CTTGACTTTTGGGATTTACCT-3’，

下游引物P-R：5’-ACTGGTGCAGTATTTTCTGTT-3’。

5.根據權利要求4所述的高產型烏膚雞品系的培育方法，其特征在于：所述的熒光定量PCR擴增反應體系為：熒光定量PCR2×緩沖液10μL，ddH₂O7μL，P-F0.5μL，P-R0.5μL，DNA模板2μL。

6.根據權利要求4所述的高產型烏膚雞品系的培育方法，其特征在于：所述的熒光定量PCR擴增反應程序為：95℃預變性2min；40個循環：95℃變性30s，57℃退火30s，72℃延伸30s；72℃延伸10min；20℃保存。

7.根據權利要求4所述的高產型烏膚雞品系的培育方法，其特征在于：所述步驟（3）中利用熒光定量PCR測定F2代烏膚雞EDN3基因的相對拷貝數，確定F2代烏膚雞個體基因型的方法，還包括以下步驟：利用標準曲線求得待測雞EDN3基因的相對拷貝數，根據其相對拷貝數鑒定雞烏膚位點的基因型。

8.根據權利要求7所述的高產型烏膚雞品系的培育方法，其特征在于：所述的利用標準曲線求得待測雞EDN3基因的相對拷貝數的方法為：熒光定量PCR擴增前，先將待測雞的DNA稀釋到同一濃度10ng/μL，將待測雞的Ct值代入標準曲線方程中，求出其對應的對數濃度，再轉化為濃度，即為該待測雞EDN3基因的相對拷貝數。

9.根據權利要求7所述的高產型烏膚雞品系的培育方法，其特征在于：所述的根據其相對拷貝數鑒定雞烏膚位點的基因型的方法為：當待測雞EDN3基因的相對拷貝數為2時，該個體為烏膚純合子；當待測雞EDN3基因的相對拷貝數為1.5時，該個體為烏膚雜合子。

10.根據權利要求1所述的高產型烏膚雞品系的培育方法，其特征在于：將步驟（4）得到的烏膚位點為FmFm基因型的高產型烏膚雞作為父本與高產蛋雞品種雜交配套，生產出更高生產性能的烏膚雞。