[發明專利]一種萌發菌液體菌種菌絲球碎化處理方法

有效

• 申請號: 201310504715.6
• 申請日: 2013-10-23
• 公開（公告）號: CN103548563A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 肖永東
• 申請（專利權）人: 關嶺百龍匯生物科技有限公司
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 谷慶紅

技術領域

本發明屬于天麻種植技術領域，特別是涉及一種萌發菌液體菌種菌絲球碎化處理方法。

技術背景

天麻是一種具有菌根的蘭科植物，無根、無綠葉，不能制造供自身生長的營養物質，天麻種子萌發后，主要依賴分解入侵其體內的蜜環菌絲而生長。天麻的成熟球莖是名貴中藥材，素有“第二人參”之稱，是我國歷代治病養身的良藥，在兩千年來歷代草本中被列為上品。天麻具有祛風濕、抗驚厥、止暈眩，降血壓的功效，尤其在鎮痛、鎮靜方面的作用更為突出，且無副作用。目前，國內外已逐漸將天麻用于保健、醫療、食品等方面。

進過長期的研究得出，萌發菌是天麻萌芽、生產和高產的共生細菌，日本人草野俊助曾于1911年發表了“天麻與蜜環菌共生”一文，爾后普遍認為，天麻在整個生長周期中，都離不開蜜環菌。由于天麻種子萌發的最適溫度與共生萌發菌生長的最適溫度不相吻合，這可能與天麻種子的生物學特性密切相關，在栽培上，一方面地考慮共生萌發菌生長所需的條件，又要滿足天麻種子發芽的溫、濕度，才能提高種子發芽率及天麻產量，為了解決以上技術問題，研究人員先對萌發菌先進行培養，然后在天麻種植時，將萌發菌接種在天麻的尾部，便于天麻萌發和生長。公知的萌發菌液體菌種菌絲球個大，接入固體栽培種中流動性差，分散不均勻，在碎化過程中容易感染雜菌、器械昂貴等；

發明內容

針對上述問題，本發明提供一種萌發菌液體菌種菌絲球碎化處理方法具有操作簡單，碎化方便，周期短，菌絲球密度高、感染幾率小，接入固體栽培種中流動性好，分散均勻，發菌快。

本發明采用以下技術方案得以實現：

一種萌發菌液體菌種菌絲球碎化處理方法，該方法包括制備母鐘、搖瓶靜置培養、搖瓶震蕩培養、碎化處理和接種六步驟即可得到栽培用種。

進一步的，所述的一種萌發菌液體菌種菌絲球碎化處理方法，包括以下步驟：

1）制備母種：將菌種塊接種到試管PDA培養基中，置于20-30℃環境中避光培養6-16天；

2）搖瓶靜置培養：將步驟1）中培養的母種切成3～5mm的小塊，用接種刀挑起菌絲體部，接種到搖瓶中，并使其懸浮在液面上，每瓶接入量為5—10塊，將接好種的搖瓶靜置在放在20～30℃的恒溫箱中培養4-14天；

3）搖瓶震蕩培養：將步驟2）中搖瓶靜置培養放在頻率為200r/min、溫度20～30℃的震蕩搖床上培養，使菌種在搖瓶中震蕩培養2～12天，得到直徑為2cm左右的菌絲球。

4）碎化處理：將步驟3）中培養好的搖瓶轉移到頻率為500r/min的電磁攪拌器上作5～15個周期攪拌，得到40～60%的碎化菌絲體。

5）接種：將碎化菌絲體接入固體栽培袋，在20～30℃黑暗條件下培養30～35天可得到栽培用種。

更進一步的，所述的一種萌發菌液體菌種菌絲球碎化處理方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）制備母種：將菌種塊接種到試管PDA培養基中，置于24-27℃環境中避光培養8-12天；

2）搖瓶靜置培養：將步驟1）中培養的母種切成3～5mm的小塊，用接種刀挑起菌絲體部，接種到搖瓶中，并使其懸浮在液面上，每瓶接入量為5～10塊，將接好種的搖瓶靜置在放在22～27℃的恒溫箱中培養6-10天；

3）搖瓶震蕩培養：將步驟2）中搖瓶靜置培養放在頻率為200r/min、溫度23～27℃的震蕩搖床上培養，使菌種在搖瓶中震蕩培養6～10天，得到直徑為2cm左右的菌絲球；

4）碎化處理：將步驟3）中培養好的搖瓶轉移到頻率為500r/min的電磁攪拌器上作5～10個周期攪拌，得到40～60%的碎化菌絲體；

5）接種：將碎化菌絲體接入固體栽培袋，在20～26℃黑暗條件下培養30～35天可得到栽培用種。

再進一步的，所述的一種萌發菌液體菌種菌絲球碎化處理方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）制備母種：將菌種塊接種到試管PDA培養基中，置于25℃環境中避光培養11天；

2）搖瓶靜置培養：將步驟1）中培養的母種切成3～5mm的小塊，用接種刀挑起菌絲體部，接種到搖瓶中，并使其懸浮在液面上，每瓶接入量為5～10塊，將接好種的搖瓶靜置在放在27℃的恒溫箱中培養11天；

3）搖瓶震蕩培養：將步驟2）中搖瓶靜置培養放在頻率為200r/min、溫度26℃的震蕩搖床上培養，使菌種在搖瓶中震蕩培養8天，得到直徑為2cm左右的菌絲球；