[發明專利]高效合成萜類化合物的重組大腸桿菌底盤細胞及其制法和應用

有效

• 申請號: 201310501221.2
• 申請日: 2013-10-22
• 公開（公告）號: CN103773729B
• 公開（公告）日: 2017-07-11
• 發明（設計）人: 王勇;熊智強;李詩淵;汪建峰
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海生命科學研究院
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/70;C12P1/04;C12P5/02;C12P5/00;C12R1/19
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司31266
• 代理人: 祝蓮君,劉真真

1.一種底盤細胞，其特征在于，所述的底盤細胞含有提高所述底盤細胞生產萜類化合物能力的基因，

且所述的基因為外源的其他微生物來源的MEP前體途徑基因模塊的基因；

且所述的底盤細胞含有提高所述底盤細胞生產萜類化合物能力的基因，并且所述的基因是來源于阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)的dxs2基因；其中，所述的dxs2基因的序列如NP_823420.1，GI:29828786所示。

2.如權利要求1所述的底盤細胞，其特征在于，所述的底盤細胞還含有選自下述的至少一個基因或其組合：

來源于阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)的idi、dxr、或ispD基因；

來源于紅霉糖多孢菌(Saccharopolyspora erythraea)的dxr、ispD、idi1、或idi2基因；

來源于歐文氏菌ATCC 55669(Erwinia taxi ATCC 55669)的ispD基因；

來源于金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的idi基因；

來源于枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)的idi基因。

3.如權利要求1所述的底盤細胞，其特征在于，所述的底盤細胞是用于生產萜類化合物的底盤細胞。

4.如權利要求1所述的底盤細胞，其特征在于，所述的底盤細胞為真核細胞或原核細胞。

5.如權利要求4所述的底盤細胞，其特征在于，所述的底盤細胞選自下組：酵母細胞、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)細胞、大腸桿菌(Escherichia coli)細胞。

6.如權利要求1所述的底盤細胞，其特征在于，所述的萜類化合物為萜類生物堿化合物。

7.如權利要求1所述的底盤細胞，其特征在于，所述的萜類化合物選自下組：半萜類化合物、單萜類化合物、倍半萜類化合物、二萜類化合物、三萜類化合物、四萜類化合物、多萜類化合物、或其組合。

8.如權利要求1所述的底盤細胞，其特征在于，所述的基因選自下組：

(1)阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)來源的dxs2基因；

(2)阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)來源的idi基因；

(3)枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)來源的idi基因；

(4)上述(1)-(3)基因的任意組合。

9.如權利要求1所述的底盤細胞，其特征在于，所述的基因是選自下組的基因組合：

(1)阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)來源的dxs2基因和阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)來源的idi基因的組合；

(2)阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)來源的dxs2基因和枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)來源的idi基因的組合；

(4)阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)來源的dxs2基因的疊加。

10.如權利要求8所述的底盤細胞，其特征在于，所述的底盤細胞還含有任選自下組的基因或其組合：

來源于阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)的dxr、或ispD基因；

來源于紅霉糖多孢菌(Saccharopolyspora erythraea)的dxr、ispD、idi1、或idi2基因；

來源于歐文氏菌ATCC 55669(Erwinia taxi ATCC 55669)的ispD基因；

來源于金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的idi基因；和/或

所述的底盤細胞還含有其它甲羥戊酸途徑(MVA途徑)和/或非甲羥戊酸途徑(MEP途徑)中的酶。