[發(fā)明專利]一種從丹參中提取純化丹參酮類單體化合物的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310498053.6
• 申請日: 2013-10-22
• 公開（公告）號: CN103665094A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐德鋒
• 申請（專利權(quán)）人: 南京慧博生物科技有限公司
• 主分類號: C07J73/00
• 分類號: C07J73/00;C07J75/00
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥植物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及到一種從中藥丹參中提取純化丹參酮I、丹參酮IIA和隱丹參酮單體化合物的制備方法。?

背景技術(shù)

丹參又名赤參，紫丹參，紅根等。為唇形科植物丹參（Salvia?miltiorrhiza?Bunge）的干燥根及根莖。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，味苦，微寒，無毒。歸心、肝經(jīng)。有活血調(diào)經(jīng)，祛瘀止痛，涼血消癰，清心除煩，養(yǎng)血安神等功效，在臨床主要用于治療心血管、高血壓、腦缺血等疾病。近年發(fā)現(xiàn)丹參可用于治療慢性肝炎、早期肝硬化、尿毒癥等，其主要化學(xué)成分為兩大類，即水溶性丹參酚酸類和脂溶性丹參酮(Tanshinone)類。后者主要含有丹參酮I?(Tanshinone?I)、丹參酮IIA(Tanshinone?IIA)和隱丹參酮(Cryptotanshinone)等鄰醌結(jié)構(gòu)丹參酮類化合物。丹參酮類化合物主要針對心血管系統(tǒng)疾病的治療作用，使病人冠脈血流量明顯增加，冠脈阻力明顯下降，改善了心肌功能，在治療冠心病、緩解心絞痛方面取得了明顯的效果。該丹參酮類化合物還具有抗菌消炎作用，對革蘭氏陽性球菌、痤瘡棒狀桿菌、金黃色葡萄球菌具有極強(qiáng)的抗菌活性；該丹參酮類化合物還對非小細(xì)胞肺癌、卵巢癌，結(jié)腸癌、中樞神經(jīng)癌等腫瘤有顯著的抑制作用。最近報(bào)道隱丹參酮可通過雄激素受體信號通路抑制前列腺癌腫瘤細(xì)胞的增長作用（Defeng?Xu,?et.?al.?Cancer?Letters.?316?(1),?11-22（2012）），報(bào)道隱丹參酮對前列腺癌DU145細(xì)胞株有抑制作用（Shin?D?S,?et.?al.,?Cancer?Res.?69(1):?193-202（2009），還可降低孕期高雄激素血癥大鼠雄性子代的雄激素合成（李喜鶴等，中國中西醫(yī)結(jié)合雜志28(11):?1001-1004（2008））。?

本發(fā)明涉及丹參酮類單體化合物，包含丹參酮類單體化合物為丹參酮I、丹參酮IIA、和隱丹參酮，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：?

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幾種丹參酮化學(xué)結(jié)構(gòu)式

隨著人們對丹參酮I、丹參酮IIA和隱丹參酮等丹參酮類化合物的生物活性及功能應(yīng)用研究，對上述丹參酮類單體化合物的純化分離具有重大意義。

目前，丹參酮類化合物的提取方法是采用中藥丹參為原材料進(jìn)行提取，要得到丹參酮I、丹參酮IIA和隱丹參酮等單體化合物通常采用硅膠柱層析的方法取得。中國專利（CN?1394870A）公開了一種以高速逆流色譜法（HSCCC）從中藥丹參中提取丹參酮化合物的方法；中國專利（CN?101411745A）公開了一種以滲漉法和大孔吸附樹脂法結(jié)合起來從中藥丹參中提取純化得總丹參酮類化合物，由于上述專利均使用大量有機(jī)溶劑，操作流程較多，可獲得的丹參酮類單體化合物比例低，生產(chǎn)成本高等技術(shù)問題。?

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種從丹參中提取純化丹參酮類單體化合物的制備方法，利用丹參酮類化合物在弱酸條件下具有良好穩(wěn)定的物化性質(zhì)，采用在弱酸條件下的多級逆流萃取法和大孔吸附樹脂分離純化相結(jié)合技術(shù)制備丹參酮類單體化合物，工藝簡單、操作簡便，成本低，能夠?qū)崿F(xiàn)批量生產(chǎn)丹參酮I、丹參酮IIA和隱丹參酮三種單體化合物。?

為了達(dá)到以上技術(shù)效果，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：?

一種從丹參中提取純化丹參酮類單體化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟A：將丹參藥材粉碎成丹參粉，加入4-8倍的70%-95%體積濃度的醇-酸水溶液，進(jìn)行多級逆流萃取提取2-6小時，提取液過濾后在30-60℃度下減壓濃縮得丹參酮粗品；

步驟B：大孔吸附樹脂分離純化：將上述丹參酮粗品加入到大孔吸附樹脂層析柱中進(jìn)行梯度洗脫，洗脫液分別收集、進(jìn)行TLC跟蹤，得到丹參酮I洗脫液、丹參酮IIA洗脫液和隱丹參酮洗脫液，分別減壓濃縮后分別得丹參酮I、丹參酮IIA和隱丹參酮。

所述醇-酸水溶液為甲醇-磷酸水溶液、乙醇-磷酸水溶液、異丙醇-磷酸水溶液、甲醇-甘氨酸水溶液、乙醇-甘氨酸水溶液、異丙醇-甘氨酸水溶液、甲醇-丙氨酸水溶液、乙醇-丙氨酸水溶液或異丙醇-丙氨酸水溶中的一種或幾種；所述醇-酸水溶液的PH值為4.0-6.5；更優(yōu)選的所述醇-酸水溶液的PH值為4.5-5.5。?

所述減壓濃縮的真空度為0.05-0.1MPa。?

所述丹參粉的粒度為20-60目。作為更優(yōu)選，丹參粉的粒度為40-50目。?

所述大孔吸附樹脂為D101型或DM-301型大孔吸附樹脂。?