[發明專利]一種血清β-羥丁酸試劑盒及其檢測方法

有效

• 申請號: 201310493809.8
• 申請日: 2013-10-21
• 公開（公告）號: CN103528977A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發明（設計）人: 李濤;溫云飛;牛慶慧
• 申請（專利權）人: 青島貝美生物技術有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/28
• 代理公司: 山東清泰律師事務所 37222
• 代理人: 聶磊

1.一種血清β-羥丁酸試劑盒，它包括R1與R2試劑，其特征在于：

所述R1試劑包含如下組分：

磷酸鉀緩沖液，???????????????100～150?mmol/L，PH7～8；

輔酶，???????????????????????2～5mmol/L；

黃遞酶，?????????????????????2～5KU/L；

氯化硝基四氮唑蘭，???????????0.5～1mmol/L；

BSA，????????????????????????0.5～1g/L；

海藻糖，?????????????????????2～5g/L；

所述R2試劑包含如下組分：

磷酸鉀緩沖液，???????????????100～150mmol/L，PH7～8；

β-羥丁酸脫氫酶，????????????20～50KU/L；

BSA，????????????????????????2～5g/L。

2.權利要求1所述的血清β-羥丁酸試劑盒的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：?

第一步，預備：

提供標準液、血清β-羥丁酸測定試劑盒R1與R2試劑以及待測標本；其中，標準液采用健康人血清為基質；

第二步，初步混勻：

取6ul待測標本和R1試劑240～280ul混勻，置30-45℃孵育3～5分鐘；

第三步，二次混勻：

取R2試劑40～70ul與上述混合液混勻，孵育180～240秒后，空白管調零，讀取吸光度A1，90秒后讀吸光度A2，其中，測區吸光度的主波長500～600nm，副波長650～750nm；

第四步，計算：

根據如下公式計算得出血清β-羥丁酸濃度：

血清β-羥丁酸（mmol/L）=?ΔA測定×標準濃度/ΔA標準?。

3.根據權利要求2所述的血清β-羥丁酸試劑盒的檢測方法，其特征在于：

第一步，預備：

血清β-羥丁酸測定試劑盒R1與R2試劑與待測標本的比例為：40～50?:?8～12?:?1。

4.根據權利要求2所述的血清β-羥丁酸試劑盒的檢測方法，其特征在于：

第一步，預備：

標準液采用健康人血清為基質，所述標準液的制備方法為：

用健康人血清混合，反復凍融數次至上層澄清，取澄清的上層液經0.15um～0.30um濾膜的過濾器過濾后，添加0.05%～0.1wt%生物防腐劑，混勻，待用；用做標準液的基質，經二級或一級參考品和參考測量方法量值溯源定值。