[發明專利]葉酸偶聯羧甲基殼聚糖納米粒作為光控釋放NO載體的制法

有效

• 申請號: 201310492713.X
• 申請日: 2013-10-18
• 公開（公告）號: CN103520720A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發明（設計）人: 萬錒俊;桂日軍
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K47/36;A61P35/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 蔣亮珠

1.一種葉酸偶聯羧甲基殼聚糖納米粒作為光控釋放NO載體的制法，其特征在于，該方法具體包括以下步驟：

(1)稱取質均分子量400kDa，脫乙酰度90％，羧甲基度1.112的羧甲基殼聚糖粉末(CMC)溶于去離子水，用0.22μM濾紙過濾后制成CMC水溶液，向其中滴加NaOH溶液，調節pH值為堿性，在避光下加入葉酸(FA)，磁力攪拌均勻，升高至一定溫度下反應；

(2)將反應后產物冷卻至室溫，用凝膠柱分離，于某一波長處監測洗脫過程，收集洗脫時流出的第一波峰的溶液，然后將其冷凍干燥，得到葉酸偶聯的羧甲基殼聚糖(CMC-FA)偶聯物；

(3)將所得CMC-FA偶聯物溶于1％醋酸水溶液，制得CMC-FA的醋酸溶液，加入Roussin粗蘇打鹽Fe₄S₃(NO)₇^-(RBS，Na⁺鹽)，在磁力攪拌下滴加多聚磷酸鈉水溶液，然后繼續攪拌反應，即得負載RBS的CMC-FA納米粒混懸液；

(4)所得混懸液被超速離心，棄除上清夜，收集沉淀物，分散在去離子水中，冷凍干燥，凍干樣研磨至粉末狀，即為CMC-FA-RBS納米粒。

2.根據權利要求1所述的葉酸偶聯羧甲基殼聚糖納米粒作為光控釋放NO載體的制法，其特征在于，步驟(1)中所述的CMC濃度1～10mg/mL，pH7～9，CMC與FA質量比5～10∶1，反應溫度50～100℃，反應時間30～120mmin。

3.根據權利要求1所述的葉酸偶聯羧甲基殼聚糖納米粒作為光控釋放NO載體的制法，其特征在于，步驟(2)中所述的監測波長為360～370nm，冷凍干燥時間12～24h。

4.根據權利要求1所述的葉酸偶聯羧甲基殼聚糖納米粒作為光控釋放NO載體的制法，其特征在于，步驟(3)中所述的CMC-FA的醋酸溶液濃度5～10mg/mL，RBS鈉鹽濃度0.1～0.5mmol/L，多聚磷酸鈉濃度0.5～1.0mg/mL，反應時間30～120min。

5.根據權利要求1所述的葉酸偶聯羧甲基殼聚糖納米粒作為光控釋放NO載體的制法，其特征在于，步驟(4)中所述的離心速度5000～14000rpm/min，離心時間30～60min，冷凍干燥時間12～24h。