[發(fā)明專利]一種左旋吡喹酮的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310487924.4
• 申請日: 2013-10-17
• 公開（公告）號: CN104557911A
• 公開（公告）日: 2015-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 錢明心
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州同力生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號: C07D471/04
• 分類號: C07D471/04;C07D217/16
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 孫仿衛(wèi);汪青

1.一種左旋吡喹酮的制備方法，其特征在于：所述制備方法包括以式2a或2b表示的化合物來制備式1表示的中間體的步驟以及由式1表示的中間體來制備左旋吡喹酮的步驟：

式1、2a和2b中，X⁺相同，且代表與羧酸根離子相抗衡的陽離子部分；

制備式1表示的中間體的方法如下：首先使式2a或2b表示的化合物與氧氣在重組D-氨基酸氧化酶和過氧化氫酶的存在下發(fā)生氧化反應(yīng)，然后使所述氧化反應(yīng)所得產(chǎn)物在硼烷-胺基絡(luò)合物的作用下發(fā)生還原反應(yīng)生成所述式1表示的中間體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的左旋吡喹酮的制備方法，其特征在于：式1、2a和2b中，X⁺表示H+、K⁺、Na⁺或NH₄⁺。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的左旋吡喹酮的制備方法，其特征在于：所述重組D-氨基酸氧化酶的制備方法為：將含有D-氨基酸氧化酶基因的重組大腸桿菌單菌落接種到含氨芐青霉素抗性的液體LB培養(yǎng)基中，于37±1℃下過夜活化12～16小時，將活化后得到的培養(yǎng)物接種到含氨芐青霉素抗性的液體LB培養(yǎng)基中，于37±1℃下振蕩培養(yǎng)，至OD₆₀₀值達(dá)到0.6～0.8時，加入誘導(dǎo)劑異丙基-β-D-硫代半乳糖苷至終濃度為0.8mmol/L～1.0mmol/L，于30±1℃下繼續(xù)培養(yǎng)8～10小時，離心，收集沉淀物，加入pH7～9的磷酸鹽緩沖液得懸浮液，將懸浮液置于冰水浴中超聲破碎，再離心，將上清液預(yù)凍至溫度降至-20℃～-30℃，然后冷凍干燥34～40小時，即得凍干的粉狀重組D-氨基酸氧化酶。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的左旋吡喹酮的制備方法，其特征在于：所述硼烷-胺基絡(luò)合物為選自為硼烷氨絡(luò)合物、硼烷二甲胺絡(luò)合物、硼烷-三乙胺絡(luò)合物、硼烷叔丁胺絡(luò)合物、硼烷二乙胺絡(luò)合物以及硼烷N,N-二異丙基乙胺絡(luò)合物中的一種或多種的組合。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的左旋吡喹酮的制備方法，其特征在于：使所述氧化反應(yīng)和還原反應(yīng)在pH7.5～9.0的水相緩沖溶液中、溫度15℃～40℃下進(jìn)行。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的左旋吡喹酮的制備方法，其特征在于：所述水相緩沖溶液為選自磷酸鈉鹽、磷酸鉀鹽、氨水中的一種或多種的組合。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的左旋吡喹酮的制備方法，其特征在于：使所述氧化反應(yīng)和還原反應(yīng)在溫度20℃～40℃下進(jìn)行。

8.根據(jù)權(quán)利要求5或6或7所述的左旋吡喹酮的制備方法，其特征在于：制備式1表示的中間體的具體過程如下：將式2a或2b表示的化合物溶于所述水相緩沖溶液中，加入硼烷-胺基絡(luò)合物，通入氧氣或空氣，加入重組D-氨基酸氧化酶和過氧化氫酶，攪拌下，于所述溫度下開始反應(yīng)，HPLC監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程，至式2a或2b表示的化合物的含量低于1wt%時，停止反應(yīng)。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的左旋吡喹酮的制備方法，其特征在于：停止反應(yīng)后，加熱使體系中的酶發(fā)生變性，過濾除酶，濾液中加入丙酮，過濾收集析出的粗品固體，再用水和丙酮的混合溶劑進(jìn)行重結(jié)晶，即得到所述式1表示的中間體。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的左旋吡喹酮的制備方法，其特征在于：從式1表示的中間體制備左旋吡喹酮的路線如下：

上述式3至式7中，R相同，且表示氨基保護(hù)基。