[發明專利]表達豬繁殖與呼吸綜合征病毒游離受體重組腺病毒組及其制備與應用有效
| 申請號： | 201310485894.3 | 申請日： | 2013-10-16 |
| 公開（公告）號： | CN103525775A | 公開（公告）日： | 2014-01-22 |
| 發明（設計）人： | 孫懷昌;陳陽;郭睿;張鑫宇;夏曉莉 | 申請（專利權）人： | 揚州大學 |
| 主分類號： | C12N7/01 | 分類號： | C12N7/01;A61K39/12;A61K31/14 |
| 代理公司： | 南京知識律師事務所 32207 | 代理人： | 盧亞麗 |
| 地址： | 225009 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 表達 繁殖 呼吸 綜合征 病毒 游離 受體 重組 病毒組 及其 制備 應用 | ||
1.表達豬繁殖與呼吸綜合征病毒游離受體重組腺病毒組，是由表達豬唾液酸粘附素前4個IgV結構域和與豬IgG?Fc片段融合蛋白的重組腺病毒，及表達脫衣殼受體CD163第5-9個SRCR結構域與豬IgG?Fc片段融合蛋白的重組腺病毒組成。
2.權利要求1所述重組腺病毒組在制備防治豬繁殖與呼吸綜合征制劑中的應用。
3.權利要求1所述表達豬繁殖與呼吸綜合征病毒游離受體重組腺病毒組的制備方法，其步驟如下：
（1）用化學合成法合成豬IgG重鏈信號肽序列，用反轉錄聚合酶鏈式反應擴增豬IgG?Fc片段、唾液酸粘附素前4個IgV結構域Sn4D和CD163第5-9個結構域SRCR59編碼序列。
（2）將Sn4D與Fc融合序列插入腺病毒載體pShuttle-CMV，獲得重組載體pShuttle-Sn4D-Fc；將豬IgG信號肽、SRCR59與Fc融合序列插入腺病毒載體pShuttle-CMV，獲得重組載體pShuttle-SRCR59-Fc.
（3）用步驟（2）獲得的兩種重組載體轉染AAV-293細胞，獲得重組腺病毒rAd-Sn4D-Fc和rAd-SRCR59-Fc。
(4)用AAV-293細胞擴增重組腺病毒。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟（2）是：將豬IgG?Fc片段編碼序列分別與Sn4D、SRCR59編碼序列融合，用Sn自身信號肽引導Sn4D-Fc融合蛋白分泌性表達，以豬IgG重鏈信號肽引導SRCR59-Fc融合蛋白分泌性表達。
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