[發明專利]一種伯胺基含量準確測定方法

無效

• 申請號: 201310482730.5
• 申請日: 2013-10-16
• 公開（公告）號: CN103512828A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發明（設計）人: 李天鐸;許靜;姜青偉;唐小龍
• 申請（專利權）人: 山東輕工業學院
• 主分類號: G01N7/18
• 分類號: G01N7/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種伯胺基含量準確測定的方法，尤其涉及一種明膠、蛋白質等生物大分子中伯胺基含量準確測定的方法包括如下步驟：

1）準備伯氨基定量儀；

?2）排空體系內的空氣；

?3）配制待測液；

?4）進行測定；按下述公式計算伯氨基含量：

其中，n₀為待測生物大分子樣品中伯氨基含量（mol），n_N2為測得的氮氣的量（mol），為待測生物大分子樣品的質量濃度，m為待測生物大分子樣品總質量（g），ρ為氮氣的質量密度（g/mL），根據量氣時的溫度T及大氣壓P查表得到，V為測量氮氣的體積（mL），M為氮氣分子量（g?/?mol），C₀為待測生物大分子樣品中伯氨基含量（mol/g）。

2.根據要求1所述的一種伯胺基含量準確測定的方法，尤其涉及一種明膠、蛋白質等生物大分子中伯胺基含量準確測定的方法，其特征是，步驟1）所述的準備伯氨基定量儀，具體操作如下：各旋塞涂抹真空硅脂，密封好各個接口，其中半球洗氣瓶排液口（26）和反應器排液口（17）用止水夾夾好，以防止液體泄漏。

3.根據權利要求1所述的一種伯胺基含量準確測定的方法，尤其涉及一種明膠、蛋白質等生物大分子中伯胺基含量準確測定的方法，其特征是，步驟2）的具體操作如下：首先將洗液，從緩沖瓶（23）緩緩倒入，注滿半球洗氣瓶（20），并使洗液至緩沖瓶（23）體積的1/3處；調節斜孔三通旋塞（29）以洗液充滿至斜孔三通旋塞（29）處，旋動斜孔三通旋塞（29），使斜孔三通旋塞（29）不與各方相通；從水準瓶（32）注入去離子水，旋動斜孔三通旋塞（29）使量氣管與排液口（22）相通，抬高水準瓶（32）的位置，當量氣管（31）充滿去離子水后，旋動斜孔三通旋塞（29），使斜孔三通旋塞（29）不與各方相通；旋動三通旋塞（10），使半球洗氣瓶（20）中的洗液充滿至三通旋塞（10），然后調節三通旋塞（10）使得半球洗氣瓶（20）不與反應裝置（Ⅰ）、回收裝置（Ⅳ）相通；該操作可以使量氣、洗氣裝置中的空氣被完全排出，此時半球洗氣瓶（20）與量氣管（31）中均充滿液體，并與外界空氣隔絕；開啟循環水浴，設定測試所需溫度，從加料管（3）加入冰醋酸，然后加入亞硝酸鈉水溶液，關閉加料管（3），加去離子水液封，用少量去離子水將加料管（14）下部細管中氣體趕入反應器（11），關閉加料管（14）；旋動三通旋塞（9），使反應器（11）和三通旋塞（10）相通；開啟磁力攪拌（7），反應器（11）內反應生成NO氣體，保持5分鐘，排凈反應器（11）內空氣。

4.根據權利要求1所述的一種伯胺基含量準確測定的方法，尤其涉及一種明膠、蛋白質等生物大分子中伯胺基含量準確測定的方法，其特征是，步驟4）的具體操作如下：打開磁力攪拌（27），旋動三通旋塞（10），使反應裝置（Ⅰ）與洗氣裝置（Ⅱ）相通；在加料管（14）中加入待測液，緩慢打開加料管（14）旋塞，使待測液緩慢流入反應器（11），并用少量去離子水沖洗加料管（14），以正辛醇液封；加料結束時閉合加料管（14）；反應器（11）從加入待測液開始計時，反應30~300分鐘停止反應；打開加料管（3）旋塞，使得加料管（3）中液體進入反應器（11），將反應器（11）中氣體完全趕入半球洗氣瓶（20）；旋動三通旋塞（10），使反應器（11）與廢液瓶（36）相通，不與半球洗氣瓶（20）相通；打開反應器（11）的排液口（17）排凈反應液；增大半球洗氣瓶（20）下方磁力攪拌（27）的攪拌速度，攪拌一定時間后，關閉磁力攪拌（27），靜置，旋動量氣管（31）上部的斜孔三通旋塞（29），把半球洗氣瓶（20）內氣體趕入量氣管（31），當洗氣液流至斜孔三通旋塞（29）處時，旋動斜孔三通旋塞（29），使得斜孔三通旋塞（29）連接的各方互不相通；然后靜置5~20分鐘，提高水準瓶（32），使水準瓶（32）內液面凹面與量氣管（31）內液面凹面相平，讀取量氣管（31）中氣體體積V，同時記錄此時氣壓P與量氣管循環水浴溫度T，用于計算待測液中伯氨基含量。